不同蛋白源和大豆抗?fàn)I養(yǎng)因子對(duì)牙鲆蛋白消化酶的活性與基因表達(dá)的影響.pdf

1、本文比較動(dòng)物蛋白源(APS)與植物蛋白源(PPS)影響牙鲆肝臟蛋白消化酶的活性水平和基因表達(dá)水平的不同效果。同時(shí)研究植物蛋白源中的不同含量的抗?fàn)I養(yǎng)因子(大豆低聚糖(SBOS)、大豆棉子糖(SR)、大豆水蘇糖(SBS)、大豆異黃酮(SBIF)、植酸(PA)、大豆皂甙(SS)等分別對(duì)牙鲆肝臟蛋白消化酶(胰腺蛋白酶、糜蛋白酶和彈性蛋白酶)的活性和基因表達(dá)的影響，結(jié)合以上外源因子(不同蛋白源和不同抗?fàn)I養(yǎng)因子)影響下的牙鲆生長性能和蛋白質(zhì)消化能力

2、，從而獲得牙鲆飼料中的外源因素(不同蛋白源、不同抗?fàn)I養(yǎng)因子)、牙鲆蛋白質(zhì)消化酶(基因表達(dá)和活性)、牙鲆生長性能三者之間的相關(guān)性分析結(jié)果。 (1)分別采用魚粉(FM)、濃縮魚蛋白(FPC)、大豆?jié)饪s蛋白(SPC)和大豆分離蛋白(SPD)作為主要蛋白源，配合四種等氮(粗蛋白，49％)、等能(總能，19 kJ/g)的飼料，研究四種蛋白源對(duì)牙鲆蛋白消化酶的活性與基因表達(dá)的影響，并分析這些影響與牙鲆消化和生長之間的關(guān)系。試驗(yàn)結(jié)果表明：PP

3、S飼料組(SPC、SPI)牙鲆肝臟的胰蛋白酶-1基因表達(dá)水平和糜蛋白酶-1基因表達(dá)(HCGE)顯著高于APS飼料組(FM、FPC)(P<0.05)，但是PPS飼料組(SPC、SPI)的牙鲆肝臟彈性蛋白酶-1前體基因表達(dá)(HEPGE)顯著低于APS飼料組(FM、FPC)(P<0.05)。PPS組牙鲆肝臟胰蛋白酶活性(HTA)和腸道胰蛋白酶(ITA)活性顯著低于APS飼料組(P<0.05)，在所有實(shí)驗(yàn)組中，F(xiàn)PC組的牙鲆肝臟胰蛋白酶活性和I

4、TA最高，SPC組牙鲆肝臟胰蛋白酶活性和ITA最低。 (2)以FM為蛋白源，添加10％大豆低聚糖(SBOS)，配制兩種等氮(粗蛋自，49％)、等能(總能，19kJ/g)的飼料，研究在飼料FM上添加10％SBOS后對(duì)牙鲆蛋白消化酶的活性與基因表達(dá)的影響，并分析這些影響與牙鲆消化和生長能力的關(guān)系。試驗(yàn)結(jié)果表明：FM添加10％SBOS對(duì)牙鲆肝臟蛋白消化酶的基因表達(dá)有顯著影響，大豆低聚糖組的牙鲆肝臟的胰蛋白酶-1基因表達(dá)水平極顯著高于對(duì)

5、照組(P<0.01)。大豆低聚糖組牙鲆肝臟的糜蛋白酶-1基因表達(dá)水平、牙鲆肝臟彈性蛋白酶-1前體基因表達(dá)水平分別低于和顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。FM添加10％SBOS后顯著降低牙鲆肝臟胰蛋白酶活性的活性(P<0.05)。 (3)FM基礎(chǔ)飼料添加大豆棉子糖(SR)中分別達(dá)到0.0％、0.5％、1.0％和1.5％的含量水平，配制等氮(粗蛋白，42％)、等能(總能，19.5 kY/g)的四種飼料，研究飼料中不同SR水平對(duì)牙鲆蛋白

6、消化酶的活性與基因表達(dá)的影響，并分析這些影響與牙鲆消化和生長之間的相關(guān)性。試驗(yàn)結(jié)果表明：飼料中的SR能夠顯著影響牙鲆蛋白消化酶的活性水平與基因表達(dá)水平。隨著飼料中SR含量的逐漸上升，牙鲆肝臟的胰蛋白酶.1基因表達(dá)水平（r=0.924，P<0.01)、牙鲆肝臟的糜蛋白酶-1基因表達(dá)水平(r=0.552，P<0.05)和牙鲆肝臟彈性蛋白酶-1前體基因表達(dá)水平(r=0.727，P<0.05)都顯著增強(qiáng)，牙鲆肝臟胰蛋白酶活性(r=0.776，P

7、>0.05)、腸道胰蛋白酶活性(r=0.970，,p<0.01)、腸道糜蛋白酶活性(r=0.790，P<0.05)下降。牙鲆肝臟的胰蛋白酶-1基因表達(dá)水平與牙鲆特定增長率(SGR)、蛋白表觀消化率(ADCp)分別成負(fù)相關(guān)(r1=-0.761，P<0.05；r2=-0.634，P<0.05)；牙鲆肝臟彈性蛋白酶-1前體基因表達(dá)水平與SGR、ADCp、PER分別成顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.971，P<0.01)；牙鲆肝臟胰蛋白酶活性與PER、A

8、DCp、SGR成顯著正相關(guān)(r1=0.778，P<0.05；r2=0.834，.P<0.05；r3=0.590，P<0.05)；牙鲆的腸道胰蛋白酶活性與ADCp、牙鲆肝臟胰蛋白酶活性、腸道糜蛋白酶活性和PER分別成顯著或極顯著正相關(guān)(r1=0.856，P<0.05；r2=0.854，P<0.05；r3=0.667，P<0.05；r4=0.772，P<0.01)；牙鲆的腸道糜蛋白酶活性與SGR、PER、肝臟的胰蛋白酶-1基因表達(dá)水平、牙鲆

9、肝臟彈性蛋白酶-1前體基因表達(dá)水平、采食量(F1)分別成顯著或極顯著負(fù)相關(guān)(r1=0.960，P<0.01；r2=0.815;P<0.05；r3=0.906，P<0.01；r4=0.907，P<0.01；r5=0.891，P<0.01)。 (4)以FM為蛋白源，添加大豆水蘇糖(SBS)到牙鲆飼料中，并分別達(dá)到0％、0.4％、0.8％、1.5％的含量水平，配制等氮(粗蛋白，49.5％)、等能(總能，19.7 kJ/g)的四種飼料，

10、研究飼料中不同SBS水平對(duì)牙鲆蛋白消化酶的活性與基因表達(dá)的影響，并分析這些影響與牙鲆消化和生長之間的相關(guān)性。試驗(yàn)結(jié)果表明：飼料中的SBS能夠顯著影響牙鲆蛋白消化酶的活性水平與基因表達(dá)水平。隨著SBS含量的增加，牙鲆肝臟的胰蛋白酶-1基因表達(dá)水平(r=0.617，P>0.05)和牙鲆肝臟的糜蛋白酶-1基因表達(dá)水平平緩加強(qiáng)。牙鲆肝臟胰蛋白酶活性(r=-0.93l，P<0.05)、腸道糜蛋白酶活性(r=-0.998，P<0.01)降低；實(shí)驗(yàn)牙

11、鲆肝臟的胰蛋白酶-1基因表達(dá)水平與ADCp成負(fù)相關(guān)(r=0.683，P<0.05)；實(shí)驗(yàn)牙鲆肝臟彈性蛋白酶-l前體基因表達(dá)水平與PER成顯著負(fù)相關(guān)(r1=-0.533，P<0.05)；實(shí)驗(yàn)牙鲆肝臟胰蛋白酶活性與ADCp成顯著正相關(guān)(r1=0.734，P<0.05)；牙鲆腸道胰蛋白酶活性與腸道糜蛋白酶活性成極顯著正相關(guān)(r=0.992，P<0.01)；實(shí)驗(yàn)牙鲆的腸道糜蛋白酶活性與SGR和PER分別成顯著正相關(guān)(r1=0.833，P<0.0

12、5；r2=0.934，P<0.05)。 (5)以FM為蛋白源，添加大豆異黃酮(SBIF)到牙鲆飼料中，并分別達(dá)到0.0％、0.1％、0.3％、0.8％的含量水平，配制等氮(粗蛋白，49.5％)、等能(總能，19.7kJ/g)的四種飼料，研究飼料中不同SBIF水平對(duì)牙鲆蛋白消化酶的活性與基因表達(dá)的影響，并分析這些影響與牙鲆消化和生長之間的相關(guān)性。試驗(yàn)結(jié)果表明：飼料中的SBIF能夠顯著影響牙鲆蛋白消化酶的活性水平與基因表達(dá)水平。隨著SBIF

13、含量的增加，肝臟的胰蛋白酶-1基因表達(dá)水平(r1=-0.732，P>0.05)，牙鲆肝臟的糜蛋白酶-1基因表達(dá)水平和牙鲆肝臟彈性蛋白酶-1前體基因表達(dá)水平(r=-0.666，P<0.05)下降，牙鲆肝臟胰蛋白酶活性(r=0.778，P<0.05)、腸道胰蛋白酶活性增強(qiáng)。牙鲆肝臟的胰蛋白酶-1基因表達(dá)水平與牙鲆肝臟胰蛋白酶活性成極顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.968，P<0.01)，與牙鲆肝臟彈性蛋白酶-1前體基因表達(dá)水平、牙鲆肝臟的糜蛋白酶-1

14、基因表達(dá)水平、SGR、PER分別成顯著或極顯著正相關(guān)(r1=0.861，P<0.05；r2=0.846，P<0.05；r3=0.788，P<0.01；r4=0.778，P<0.05)；牙鲆肝臟的糜蛋白酶-1基因表達(dá)水平與SGR和ADQp分別成顯著或極顯著的負(fù)相關(guān)(r1=-0.845，p<0.05；r2=-0.777，P<0.01)；牙鲆肝臟彈性蛋白酶-1前體基因表達(dá)水平與SGR和PER分別成顯著正相關(guān)(r1=0.624，P<0.05；

15、r2=0.856，P<0.05)；牙鲆肝臟胰蛋白酶活性與SGR、ADCp和PER分別成顯著正相關(guān)(r1=0.906，P<0.05；r2=0.734，P<0.05；r3=0.814，P<0.05)。 (6)以FM為蛋白源，添加植酸(PA)到牙鲆飼料中，并分別達(dá)到0.0％、0.2％、0.4％、0.8％的含量水平，配制等氮(粗蛋白，49.50％)、等能(總能，19.7 kJ/g)的四種飼料，研究飼料中不同PA水平對(duì)牙鲆蛋白消化酶的活性

16、與基因表達(dá)的影響，并分析這些影響與牙鲆消化和生長之間的相關(guān)性。試驗(yàn)結(jié)果表明：飼料中的PA能夠顯著影響牙鲆蛋白消化酶的活性水平與基因表達(dá)水平。隨著PA含量的增加，牙鲆肝臟的胰蛋白酶-1基因表達(dá)水平(r=-0.258，P>0.05)、牙鲆肝臟的糜蛋白酶-1基因表達(dá)水平(r=-0.43l，P>0.05)、牙鲆肝臟彈性蛋白酶-1前體基因表達(dá)水平(r=-0.850，P<0.05)、牙鲆肝臟胰蛋白酶活性(r=-0.776，P<0.01)、腸道胰蛋白

17、酶活性(r=-0.914，P<0.01)和腸道糜蛋白酶活性(r=-0.998，P<0.01)都下降，牙鲆肝臟胰蛋白酶活性與ADCP、PER、SGR、NPU分別成顯著或極顯著的正相關(guān)(r1=0.980，P<0.01；r2=0.836，P<0.01;r3=0.947，P<0.01；r4=0.837，P<0.05)；牙鲆的腸道胰蛋白酶活性與PER、F1分別成極顯著負(fù)相關(guān)(r1=-0.772，P<0.01；r2=-0.987，P<0.01)，與