小鼠沙眼衣原體肺感染過程中Treg細(xì)胞與Il-17-Th17反應(yīng)的初步研究.pdf

1、目的：
　　 沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis，C.trachomatis)感染是目前全球嚴(yán)重公共衛(wèi)生問題之一，然而其相關(guān)的感染免疫機(jī)制尚未闡明。Treg與Th17是近年來頗受關(guān)注的密切相關(guān)的兩群重要免疫細(xì)胞，參與多種感染性疾病進(jìn)程，但在衣原體感染中二者關(guān)系尚不清楚。本研究擬在建立沙眼衣原體小鼠肺感染模型的基礎(chǔ)上，對沙眼衣原體在BALB/c小鼠肺部感染過程中CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(reg

2、ulatory T cells，Treg)與IL-17/Th17反應(yīng)關(guān)系進(jìn)行初步研究。
　　 方法：
　　 取6-8周齡的BALB/c小鼠，鼻腔吸入25μl含5×103 IFU的沙眼衣原體鼠肺炎菌株(Chlamydia muridarum，Cm)，建立沙眼衣原體小鼠肺感染模型。監(jiān)測感染后不同時(shí)期小鼠體重變化;檢測肺組織衣原體包涵體形成單位(IFU)及肺組織病理改變;利用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測肺組織中髓過氧化物酶(MPO)

3、的水平;利用流式細(xì)胞術(shù)檢測Cm感染后小鼠脾臟和縱隔淋巴結(jié)(MLN)中CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞百分率及脾臟中CD4+CD44+IL-17+T細(xì)胞的百分率;RT-PCR檢測肺組織中IL-6、TGF-β、IL-17、IL-2、IFN-γ細(xì)胞因子和趨化因子KC(keratinocyte derived chemokine)和MIP-2(macrophage inflammatoryprotein-2)mRNA的表達(dá)差異;進(jìn)一步

4、通過ELISA檢測肺組織上清液IL-6、TGF-β、IL-17、IL-2細(xì)胞因子的的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：
　　 用5(×)103IFU Cm經(jīng)鼻腔吸入感染后小鼠發(fā)生沙眼衣原體肺炎，表現(xiàn)為體重下降、肺組織大量炎癥細(xì)胞浸潤并可檢測到衣原體的繁殖。肺組織中MPO從第3天開始增高，第7天達(dá)到峰值，隨后隨著炎癥的清除逐漸減少。Cm感染后第3天，小鼠體內(nèi)Treg細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的百分比明顯降，隨后開始恢復(fù)，第7天恢復(fù)原來水平

5、，一直持續(xù)到衣原體清除。IFN-γ在感染后的第3天顯著升高，與Treg細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)。TGF-β、IL-2的表達(dá)與Treg細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化一致。與Th17相關(guān)細(xì)胞因子IL-6、IL-17和Th17相關(guān)趨化因子KC、MIP-2的表達(dá)于第3天開始升高，至第7天達(dá)到最高水平，隨后逐漸減少。脾臟CD4+CD44+IL-17+T細(xì)胞從第3天開始增高，第7天大量擴(kuò)增。
　　 結(jié)論：
　　 BALB/c小鼠呼吸道感染衣原體后，引起典型的鼠衣