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1、目的:觀察HANS針刺對海洛因成癮大鼠學(xué)習(xí)記憶、海馬CREB和p-CREB表達(dá)及海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響,初步探討其作用機制,為針刺戒毒提供一定的理論依據(jù)。 方法:54只Wister大鼠隨機分為對照組和實驗組,實驗組又分為海洛因成癮組(簡稱成癮組)和海洛因成癮后自然戒斷針刺組(簡稱針刺組),按劑量遞增原則,給Wister大鼠皮下注射海洛因,1日2次,連續(xù)9天,第10天用納洛酮催促戒斷,確定海洛因成癮模型的建立。對照組以同樣方式注射
2、等量生理鹽水。成癮組繼續(xù)給海洛因維持量(27mg/kg)5天,針刺組則停止給藥,給予HANS針刺(每天1次,連續(xù)5天)。三組(對照組、成癮組、針刺組)各自進行跳臺實驗測試大鼠學(xué)習(xí)記憶,石蠟切片HE染色光鏡下觀察海馬神經(jīng)元形態(tài)及數(shù)量的變化;免疫組化法檢測各組大鼠海馬CREB、p-CREB的表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:1.建立的海洛因成癮模型組大鼠催促戒斷癥狀的評分符合海洛因成癮模型評分標(biāo)準(zhǔn),并且實驗組和對照組大鼠的戒斷評分
3、有顯著性差異(P<0.01)。2.跳臺試驗結(jié)果表明:成癮組和對照組大鼠比較,反應(yīng)時間及累積電擊時間均延長(P<0.01),跳臺潛伏期縮短(P<0.01),錯誤次數(shù)增加(P<0.01);針刺組和成癮組大鼠比較,反應(yīng)時間及累積電擊時間縮短,跳臺潛伏期延長,錯誤次數(shù)減少(P<0.01)。3.免疫組化結(jié)果顯示:與對照組比較,成癮組大鼠海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)、DG區(qū)CREB、p-CREB表達(dá)增強(P<0.05);針刺組大鼠海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)、
4、DG區(qū)CREB、p-CREB表達(dá)顯著增強(P<0.01)。4.流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示:與對照組相比,成癮組大鼠海馬細(xì)胞凋亡率增加(P<0.01),針刺組大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率較成癮組降低(P<0.05)。 結(jié)論:1.海洛因成癮引起大鼠學(xué)習(xí)記憶下降;2.海洛因成癮可使大鼠海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)、DG區(qū)CREB、p-CREB表達(dá)增強,針刺使CREB及其磷酸化水平進一步升高,提示p-CREB參與大鼠海馬學(xué)習(xí)記憶過程;3.海洛因成癮大鼠海馬
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