桑葉抑制酪氨酸酶活性成分的研究.pdf

1、長期以來，色素沉著現(xiàn)象一直是困擾人類皮膚的一大問題，雖然對(duì)人們的健康和生命沒有太大的影響，但這些皮膚亞健康的狀態(tài)卻令很多人苦惱。尤其近年來隨著生活、工作節(jié)奏的不斷加快，作息無規(guī)律性，以及由于污染而引起的環(huán)境和臭氧層的破壞，從而導(dǎo)致患有各種黑色斑癥狀的人群同趨增多?？寡趸瘎┖兔腊讋幕蛩缴霞訌?qiáng)皮膚的正常生理功能，延緩皮膚的衰老，祛除或減輕色素沉著現(xiàn)象，已在化妝品領(lǐng)域廣泛使用。從天然植物中尋找低毒、高效的美白活性成分已成為該領(lǐng)域研究的一

2、個(gè)重要方向。 桑葉，?？坡淙~喬木桑樹(Morus alba L．)葉，作為國家衛(wèi)生部批準(zhǔn)的藥食兩用原料，安全性好，無副作用，早已在民間廣泛應(yīng)用。近年來，各國研究人員對(duì)桑葉的組成、功能和作用機(jī)理進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)桑葉中含有豐富的氨基酸、維生素、纖維素、礦物質(zhì)以及多種生理活性物質(zhì)，具有降血糖、降血壓、降血脂、抗氧化、抗衰老等多種功效。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道桑葉的乙醇提取物對(duì)酪氨酸酶活性有一定的抑制作用，但桑葉有效成分對(duì)抑制酪氨酸酶活性的

3、研究尚未見確切報(bào)道。為了進(jìn)一步探索并研究桑葉中的抗氧化、抑制酪氨酸酶活性的有效成分，本實(shí)驗(yàn)采用DPPH、ABTS法和Dopa oxidase法，以抑制率為活性指標(biāo)對(duì)桑葉中的抗氧化和抑制酪氨酸酶的活性成分進(jìn)行了較為系統(tǒng)地研究。 本實(shí)驗(yàn)對(duì)桑葉乙醇提取物經(jīng)過溶劑梯度萃取得到-石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物。通過查閱文獻(xiàn)黃酮類有效成分主要集中在乙酸乙酯萃取部分，再分析桑葉中的系列化學(xué)成分的基礎(chǔ)上，篩選出有效部位為乙酸乙酯萃取

4、物，并對(duì)有效部位進(jìn)行了化學(xué)成分的分離結(jié)構(gòu)鑒定和單體化合物的抗氧化和酪氨酸酶活性抑制試驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：(一)采用反復(fù)硅膠柱層析對(duì)乙酸乙酯萃取物進(jìn)行進(jìn)一步的分離，共得到7個(gè)晶體化合物。根據(jù)理化性質(zhì)、以及<'1>H-NMR、<'13>C-NMR和MS等波譜數(shù)據(jù)分析鑒定了7個(gè)已知化合物的結(jié)構(gòu)，它們分別是：β-谷甾醇(β-sitosterol)(1)、辛酸octanoic acid (2)、胡蘿卜苷(daucosterol)(3)、山

5、奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside)(4)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside)(5)、槲皮苷(quercitrin)(6)、桑黃素-3-O-β-D-葡萄糖苷(morin-3-O-β-D-glucopyranoside)(7)。(二)在分析鑒定化合物的基礎(chǔ)上，對(duì)量較多的化合物4和化合物5進(jìn)行進(jìn)一步的酸水解得

6、到化合物8和化合物9，與已知標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照TLC，以及<'1>H-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對(duì)照，由此推斷化合物8和化合物9的結(jié)構(gòu)，分別為kaempferol(8)、quercetin(9)。(三)對(duì)化合物4、化合物5、化合物6、化合物7、化合物8和化合物9進(jìn)行酪氨酸酶活性的抑制試驗(yàn)結(jié)果表明，化合物8和化合物9均對(duì)酪氨酸酶活性有較好的抑制作用，以arbutin作為陽性對(duì)照，發(fā)現(xiàn)化合物8和化合物9的抑制率大于arbutin，且其IC50值要明顯小于ar