pp6068克隆蛋白與BACE1的相互作用.pdf

1、阿爾茨海默氏病(Alzheimer'sdisease，AD)是一種以漸進性記憶力喪失和認知障礙為主要癥狀的神經(jīng)退行性疾病，在患者腦部出現(xiàn)兩個明顯的病理組織學特征：即細胞內神經(jīng)原纖維纏結(neurofibrillarytangle，NFT)和細胞外形成淀粉樣斑(senileplaque，SP)。研究表明SPs中含有大量的β—淀粉樣蛋白(beta—Amyloidprotein，Aβ)，BACE1(β—siteAPP—cleavingenzy

2、me；APP，amyloidprecursorprotein)被認為是Aβ形成的關鍵酶，已經(jīng)成為目前阿爾茨海默癥研究的熱點之一。但目前對于BACE1的生理功能和作用機制仍然缺乏全面的了解。 為了更清楚地認識和了解BACE1在阿爾茨海默癥發(fā)病過程中的作用，我們實驗室以BACE1的胞內端第473位至第501位氨基酸構建誘餌蛋白，利用酵母雙雜交的方法在人胎腦cDNA文庫進行篩選，得到一個能與BACE1相互作用的蛋白：pp6068克隆蛋

3、白。 我們構建了pp6068克隆蛋白在哺乳動物細胞中的穩(wěn)定表達的載體，免疫共沉淀實驗證明外源性的pp6068克隆蛋白和BACE1在HEK293T細胞中能夠發(fā)生相互作用。在N2a/APP695細胞中，pp6068克隆蛋白的過表達能夠上調BACE1的水解產(chǎn)物APP/βCTF和Aβ的蛋白水平，同時，還能夠下調α—分泌酶的水解產(chǎn)物sAPPα的蛋白水平。 這些研究說明，pp6068克隆蛋白可能參與了BACE1活性的調節(jié)，影響APP