糖尿病大鼠腎組織中MMP-2和MMP-9的表達(dá)及腺相關(guān)病毒介導(dǎo)血管抑素的干預(yù)研究.pdf

1、目的:
　　 (1)觀察基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)在糖尿病大鼠腎組織中的表達(dá)情況;
　　 (2)探討腺相關(guān)病毒介導(dǎo)血管抑素(recombinant adeno-associated virus carrying human angiostatin gene,rAAV-AS)對(duì)糖尿病腎病大鼠腎皮質(zhì)中MMP-2和MMP-9表達(dá)的影響及可能機(jī)制。
　　 方法:采用鏈脲佐菌素(ST

2、Z)60mg/kg腹腔注射法建立糖尿病動(dòng)物模型。清潔級(jí)SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠隨機(jī)分為正常組(NC組,n=10),糖尿病腎病組(DN組,n=15),腺相關(guān)病毒空載體組(rAAV-0組,2×1012VG/kg BW,n=15),腺相關(guān)病毒介導(dǎo)血管抑素組(rAAV-AS組,2×1012VG/kg BW,n=15);第10周檢測(cè)大鼠的微量白蛋白尿及腎臟肥大指數(shù)、腎功能、血糖、糖化血紅蛋白;免疫印跡法檢測(cè)腎組織中血管抑素的表

3、達(dá),免疫組化法觀察腎皮質(zhì)內(nèi)MMP-2、MMP-9表達(dá)的變化,光鏡觀察腎組織病理變化。
　　 結(jié)果:
　　 (1)免疫印跡法結(jié)果:與NC組比較,DN組及rAAV-0組AS表達(dá)均減少,rAAV-AS組大鼠腎組織中AS表達(dá)明顯增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);
　　 (2)生化指標(biāo)結(jié)果:與NC組比較,rAAV-AS組、DN組及rAAV-0組BG、HbA1c、SCr、MAU、BUN均明顯升高(P＜0.05);rAA

4、V-AS組SCr、MAU、BUN較DN組及rAAV-0組降低(P＜0.05),但各組間BG、HbA1c差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。DN組與rAAV-0組各指標(biāo)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 (3)免疫組化結(jié)果:NC組中MMP-2、MMP-9在腎小球及腎小管中均有微量表達(dá),DN組及rAAV-0組的表達(dá)則明顯減弱,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),且主要在腎小球系膜細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞,而rAAV-AS組的表達(dá)較D

5、N組及rAAV-0組增強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)通過(guò)腺相關(guān)病毒載體介導(dǎo),血管抑素可以在腎組織中持續(xù)較高水平的表達(dá);
　　 (2)糖尿病大鼠腎組織中MMP-2和MMP-9的表達(dá)水平明顯減少;
　　 (3)rAAV-AS對(duì)糖尿病大鼠腎臟具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能是通過(guò)增加糖尿病大鼠腎組織中MMP-2和MMP-9的表達(dá),從而減少腎組織細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的積聚有關(guān),且這種保