不同分離方法對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化影響的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 目的：用全骨髓法和密度梯度離心兩種方法對(duì)兔骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)進(jìn)行體外分離、培養(yǎng)及擴(kuò)增，對(duì)比在培養(yǎng)基中只加入TGF-β1一種誘導(dǎo)物質(zhì)情況下，兩種方法得到的MSCs的成軟骨能力及差別。 方法：用3﹪戊巴比妥鈉1mg/kg耳緣靜脈麻醉，無菌條件下用骨穿針從兩側(cè)股骨大轉(zhuǎn)子處穿入股骨髓腔內(nèi)，骨穿針接10ml注射器，每側(cè)各抽取骨髓3～4ml，混合后等分為兩份，一份(A組全骨髓法)中直接加入DMEM-LG培養(yǎng)液，用全骨髓法培養(yǎng)

2、細(xì)胞，另一份(B組密度梯度離心法)加入裝有Percoll分離液的無菌離心管中，1000r/min離心10min，吸取液面交界處云霧狀單核細(xì)胞層細(xì)胞，制成單細(xì)胞懸液。 結(jié)論：1.密度梯度離心法可以在原代即獲得較純的細(xì)胞，但原代細(xì)胞生長比較緩慢；全骨髓法雖然只能在傳代后得到較純的細(xì)胞，但原代細(xì)胞的倍增速度明顯優(yōu)于前者； 2.生長曲線顯示，兩種方法分離方法得到的BMSCs生長良好，并且第3代的生長曲線表明二者的增長速率沒有差別；

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