小鼠肝臟CD24+ NKT細胞的來源鑒定.pdf

1、自然殺傷性T細胞也稱為NKT細胞是一類非傳統(tǒng)型的T淋巴細胞，它既表達T細胞的表面marker又表達NK細胞的表面marker，主要識別由抗原提呈分子CD1d所提呈的脂類分子。與常規(guī)T細胞不同，NKT細胞表達恒定的TCR鏈（小鼠:Vα14-Jα18;人類:Vα24-Jα18）。NKT細胞具有重要的免疫調節(jié)功能:首先成熟的NKT細胞可以分泌大量的Th1型細胞因子，同時具有分泌Th2型細胞因子的能力，并且具有殺傷功能，可以直接或者間接的與DC

2、、B細胞等多種細胞發(fā)生相互作用;其次NKT細胞不同的亞群體現(xiàn)了不同的免疫調節(jié)功能，目前為止，在不同的組織中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了不同的NKT亞群，NKT細胞發(fā)育過程中需要多種轉錄因子，根據(jù)轉錄因子的不同，可以分為NKT1，NKT2，NKT17三種NKT細胞亞群。NTK1主要位于肝臟與脾臟中，NKT2主要位于肺臟中，而NKT17主要位于外周淋巴結中，最新發(fā)現(xiàn)的產(chǎn)生IL10的NKT10則主要存在于脂肪組織，具有NK1.1-CD4-的表型，并且這群NKT

3、10的發(fā)育不依賴于PLZF。NKT細胞不同的亞群在不同的組織中發(fā)揮不同的功能，而NKT細胞不同亞群是NKT細胞發(fā)揮不同功能的重要前提，因此我們想要深入的對NKT細胞的功能進行研究，那么尋找NKT細胞的新亞群則具有重要的意義。
　　為了找到和深入研究NKT細胞新亞群，在實驗室前期的工作中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)小鼠外周組織中只有肝臟和腸系膜淋巴結存在一群特殊的CD24+ NKT細胞，在前面實驗的基礎上，我們對肝臟CD24+ NKT的表型進一步鑒定，

4、我們發(fā)現(xiàn)肝臟CD24+ NKT不同于胸腺CD24+ NKT，其高表達CD44，低表達PD1，且肝臟中CD24+ NKT與CD24-NKT的Tetramer表達相同，而胸腺中CD24+ NKT的Tetramer表達要比CD24-NKT的低;我們對肝臟CD24+ NKT的定位與來源進行了鑒定，初步的實驗證明肝臟CD24+ NKT主要位于肝臟血竇中，且肝臟CD24+NKT是可以由其他組織的NKT細胞在肝臟特殊微環(huán)境下形成的一種特殊的NKT細胞

5、亞群;同時，脾臟NKT轉輸?shù)紺D1d KO小鼠中可以發(fā)育為肝臟CD24+ NKT，表明其在肝臟的發(fā)育是不依賴于CD1d的;我們也發(fā)現(xiàn)肝臟CD24+ NKT不受腸道菌群的影響;為了進一步檢測肝臟CD24+ NKT與CD24-NKT之間或者胸腺CD24+ NKT與CD24-NKT之間的差異，我們進行了樣品準備方法的確定，目前我們也正在準備測序當中。在對ob/ob疾病模型小鼠中這群細胞的研究，我們發(fā)現(xiàn)ob/ob小鼠肝臟中CD24+ NKT細胞