17β-雌二醇共軛衍生物對大鼠腦缺血再灌注神經(jīng)損傷的保護(hù)作用及機(jī)制.pdf

1、目的：本研究以 SD大鼠缺血再灌注神經(jīng)損傷為模型，探討17β-雌二醇共軛衍生物(E2-BSA)對腦缺血再灌注神經(jīng)損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。
　　方法：通過建立SD大鼠腦缺血再灌注損傷模型，將實(shí)驗(yàn)動物分為假手術(shù)組(SH)、模型組(IRI)、不同濃度 E2-BSA治療組、10μM E2-BSA+核內(nèi)雌激素受體抑制劑ICI182780組(ICI)和10μM E2-BSA加PI3K抑制劑LY294002組（LY）。首先通過HE染色觀察不同濃

2、度 E2-BSA對大鼠缺血再灌注神經(jīng)損傷的保護(hù)作用，篩選出最佳的E2-BSA預(yù)保護(hù)濃度；然后進(jìn)一步通過 DNA ladder、RT-PCR和 western blot觀察E2-BSA抗SD大鼠缺血再灌注致神經(jīng)損傷與核外雌激素受體及PI3K/Akt信號途徑的關(guān)系，并檢測PI3K/Akt下游信號分子Caspase3的活性變化。
　　結(jié)果：E2-BSA對大鼠腦缺血再灌注損傷神經(jīng)細(xì)胞起保護(hù)作用，并且較其它濃度，10μM E2-BSA處理后

3、HE染色示大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞和海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞損傷較輕。western blot結(jié)果顯示，腦缺血再灌注損傷可明顯抑制神經(jīng)細(xì)胞Akt的活性；E2-BSA可上調(diào)腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)細(xì)胞Akt的活性，PI3K抑制劑LY294002可抑制E2-BSA對Akt活性的上調(diào)作用。DNA ladder結(jié)果顯示，腦缺血再灌注損傷可明顯誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡，給以E2-BSA處理后神經(jīng)細(xì)胞凋亡明顯減輕，核內(nèi)雌激素受體抑制劑不能逆轉(zhuǎn)E2-BSA的抗凋亡作用，但可被P

4、I3K抑制劑LY294002所逆轉(zhuǎn)。RT-PCR和western blot結(jié)果顯示，腦缺血再灌注損傷可明顯促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞caspase3表達(dá)；給以E2-BSA處理后，腦缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的caspase3高表達(dá)明顯減輕，核內(nèi)雌激素受體抑制劑不能逆轉(zhuǎn)E2-BSA對caspase3高表達(dá)的抑制作用，但可被PI3K抑制劑LY294002所逆轉(zhuǎn)。
　　結(jié)論：E2-BSA側(cè)腦室注射可有效地起到對腦缺血再灌注損傷大鼠神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用。E2-B