馬來酸桂哌齊特對腦缺血大鼠模型神經(jīng)保護作用研究.pdf

1、背景：腦血管病是常見的神經(jīng)系統(tǒng)危重疾病，其中腦梗死占腦血管病的56.6％～80%，致殘率為第一位，給社會和家庭帶來沉重負擔。腦缺血梗死后，會促發(fā)一系列的缺血級聯(lián)反應，這一病理損傷過程涉及一系列蛋白的激活和基因調(diào)控的變化，造成神經(jīng)元的損害往往是不可逆的。目前對缺血性腦卒中的研究多集中缺血后抑制缺血損傷反應，較少涉及內(nèi)源性神經(jīng)保護的作用。腺苷(Adenosine)是組織細胞產(chǎn)生并釋放的ATP內(nèi)源性代謝產(chǎn)物，能通過特異性受體介導發(fā)揮自穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)

2、作用及神經(jīng)調(diào)質(zhì)作用而保護缺血后腦組織。但外源性腺苷半衰期太短及大劑量可導致心律失常等嚴重副作用，限制了它在臨床上的使用。馬來酸桂哌齊特（cinepazide maleate，CM），通過阻滯細胞對腺苷重吸收及抑制腺苷脫氨酶活性，具有獨特的內(nèi)源性腺苷增效作用。我們通過預先給予CM并建立永久大腦中動脈阻塞（permanent middle cerebral artery occlusion，pMCAO）模型，觀察CM預處理對腦缺血的保護作用

3、，探討可能的機制。本課題分為兩部分：
　　第一部分、腺苷增效劑（馬來酸桂哌齊特）對局灶性腦缺血大鼠模型保護效應
　　目的：初步探討腺苷增效劑（CM）對pMCAO模型大鼠神經(jīng)保護作用。
　　方法：首先通過給予SD大鼠不同劑量的CM或生理鹽水，然后用線栓法建立pMCAO模型大鼠，觀察其對大鼠行為學的影響，為下一步實驗提供經(jīng)濟、有效可行的使用劑量；將SD大鼠隨機分為缺血對照組、馬來酸桂哌齊特預處理組，根據(jù)劑量摸索的結(jié)果預先給

4、予CM預處理，制作pMCAO模型大鼠后，比較缺血對照組和馬來酸桂哌齊特預處理組缺血損傷后梗死體積并應用磁共振波譜技術測定兩組缺血損傷后不同時間（3h、6h和24h）及不同部位（梗死核心區(qū)、梗死周圍區(qū)及其對側(cè)腦區(qū)相應部位）的代謝物：氮-乙酰天門冬氨酸（NAA）、肌酸（Cr）和膽堿化合物（Cho）的濃度變化；比較不同部位的代謝物相對濃度（rNAA、rCr和rCho）的差異。
　　結(jié)果：CM預處理能夠改善pMCAO模型大鼠的神經(jīng)功能并減

5、少梗死體積；MRS顯示，缺血梗死早期梗死核心區(qū)與周圍區(qū)以NAA下降為主，核心區(qū)rNAA隨時間變化進行性下降，CM能減少NAA的降低。
　　結(jié)論：CM具有保護神經(jīng)元，提高抗缺血缺氧的能力；NAA作為神經(jīng)元的標志物，可成為評判藥物對腦細胞保護或治療效果的一個敏感性指標。
　　第二部分、馬來酸桂哌齊特對局灶性腦缺血大鼠模型缺血半暗帶MAPK信號轉(zhuǎn)導通路的影響
　　目的：觀察CM預處理對大鼠腦缺血半暗帶ERK1/2和p38MA

6、PK磷酸化表達的影響，探討其對腦缺血保護的可能作用機制。
　　方法：SD大鼠隨機分為缺血對照組、CM預處理組和假手術組。用線栓法建立pMCAO模型大鼠；應用特異性抗體，通過免疫組化和western印跡法檢測三組大鼠急性腦缺血后半暗帶區(qū)不同時間點ERK和P38磷酸化表達的變化。
　　結(jié)果：CM預處理能上調(diào)缺血半暗帶區(qū)ERK磷酸化的表達，抑制p38磷酸化的表達。
　　結(jié)論：可能激活MAPK信號通路是馬來酸桂哌齊特保護缺血性