高效液相色譜法檢測小麥和啤酒樣品中赭曲霉毒素A的方法研究.pdf

1、赭曲霉毒素(OT)是由曲霉屬和青霉屬中的某些菌種產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物，是異香豆素聯(lián)結(jié)L-苯丙氨酸在分子結(jié)構(gòu)上類似的一組化合物。赭曲霉毒素(OT)主要包括赭曲霉毒素A(OA)、赭曲霉毒素B(OB)、赭曲霉毒素C(OC)、赭曲霉毒素D(OD)等七種，其中以O(shè)A為主，OA的毒性最強(qiáng)、污染最為嚴(yán)重、分布最為廣泛。OA主要由純綠青霉、赭曲霉和碳黑曲霉三種真菌產(chǎn)生。主要危及人和動物的腎臟，動物實(shí)驗(yàn)表明：OA是一種具有強(qiáng)烈腎臟毒性和肝臟毒性的真菌毒素，

2、并具有致癌、致突變、致畸、神經(jīng)毒性和免疫抑制等毒性。在目前己知的真菌毒素家族中，根據(jù)其重要性及危害性，OA被認(rèn)為是僅次于黃曲霉毒素而列于第二位；1993年，國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)將其定為ⅡB類致癌物(人類可能的致癌物)。聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)、世界衛(wèi)生組織食品添加劑聯(lián)合專家委員會(WHOJECFA)及歐盟等國家都對OA進(jìn)行了深入的大量的研究，調(diào)查并評價了OA在多類食品中的污染水平及本國居民對OA膳食暴露量，制定了食品中OA的相關(guān)

3、法規(guī)和最大允許限量值，以保護(hù)本國居民的身體健康。OA主要污染糧谷類食品、動物組織、咖啡、牛奶、酒類等產(chǎn)品；谷類糧食是人類膳食攝入赭曲霉毒素的一類主要來源，另根據(jù)歐洲的調(diào)查結(jié)果，食品添加劑和污染物法典委員會(CCFAC)指出酒類是僅次于谷類是人類膳食攝入赭曲霉毒素的又一主要來源；我國是農(nóng)產(chǎn)品大國而且飲食傳統(tǒng)是以谷類糧食食品為主，而且我國又是酒類的消耗大國，OA對我國居民的身體健康可能構(gòu)成潛在性危害，因此應(yīng)加強(qiáng)谷類糧食和酒類中OA的檢測，了

4、解OA每日可能的攝入量。食品添加劑和污染物法典委員會(CCFAC)對小麥、大麥等谷類及其相關(guān)產(chǎn)品中赭曲霉毒素A的限量為要低于5μg/kg。而我國現(xiàn)行的國家標(biāo)準(zhǔn)方法是薄層色譜法(TLC)，其最低檢出量為10μg/kg，顯然薄層色譜法已不適用于我國的OA污染水平檢測。我國對于赭曲霉毒素的研究尚在起步階段，對OA的研究還比較少，還沒有OA的污染水平和人群中OA的膳食攝入量的研究，因此，本研究建立了一種簡單、可靠、靈敏的OA檢測方法，并成功地應(yīng)

5、用于河北省食管癌高發(fā)區(qū)磁縣的小麥和市售啤酒中OA的檢測分析。 目的：分別研究反相高效液相色譜法檢測小麥和啤酒樣品中赭曲霉毒素A的方法；并用該方法對河北省食管癌高發(fā)區(qū)磁縣的小麥和某市市售啤酒中OA的污染情況進(jìn)行檢測。 方法：30份小麥樣品在食管癌高發(fā)區(qū)河北省磁縣隨機(jī)采集，35份啤酒樣品采自某市零售市場和超市。樣品中OA經(jīng)過提取后，經(jīng)C<,18>固相萃取小柱凈化，凈化液用反相BDS C<,18>柱(250×4.6mm)高效液

6、相色譜法分離，以乙腈∶水∶乙酸(99∶99∶2，v/v/v)作為流動相，用熒光檢測器(激發(fā)波長為333nm，發(fā)射波長為460nm)檢測樣品中的OA含量，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品比較，根據(jù)保留時間定性和峰面積定量。 結(jié)論：研究了采用C<,18>固相萃取小柱凈化、用熒光檢測器檢測小麥和啤酒樣品中赭曲霉毒素A的高效液相色譜法(HPLC)，該方法簡便、比較準(zhǔn)確可靠，靈敏度較高，本實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度、精密度均較好，檢出限也較低；用本方法對樣品測定結(jié)果提示