腹水細(xì)胞mtDNA突變檢測(cè).pdf

1、影響腫瘤發(fā)生、發(fā)展的機(jī)制尚不完全清楚。線粒體是細(xì)胞內(nèi)重要的細(xì)胞器,參與了細(xì)胞內(nèi)諸多功能的實(shí)現(xiàn),如能量代謝、離子平衡、脂質(zhì)、氨基酸和核酸的合成、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、增殖以及凋亡等。線粒體是細(xì)胞質(zhì)重要成分之一,線粒體功能不全是腫瘤細(xì)胞最重要的特征之一,線粒體DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)突變見(jiàn)于多種腫瘤,且可能與多種腫瘤的發(fā)生及腫瘤進(jìn)展、轉(zhuǎn)移等惡性表型有關(guān)。研究表明,正常細(xì)胞與轉(zhuǎn)化細(xì)胞的線粒體存在顯著差異。
　　 線粒

2、體DNA是哺乳動(dòng)物細(xì)胞核外唯一遺傳物質(zhì),線粒體基因突變與腫瘤的關(guān)系日益受到關(guān)注。mtDNA編碼參與氧化磷酸化和ATP生成所需多肽,由于其獨(dú)特的生物學(xué)環(huán)境和結(jié)構(gòu)特性,與核基因組相比,mtDNA更容易發(fā)生氧化損傷和突變。MtDNA突變是否參與腫瘤的形成,抑或它們僅僅是腫瘤發(fā)生過(guò)程中的繼發(fā)事件有待深入研究。已經(jīng)在很多腫瘤組織及細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)了mtDNA結(jié)構(gòu)和功能的變化;腫瘤細(xì)胞mtDNA的核內(nèi)整合可能是導(dǎo)致細(xì)胞癌變的重要因素。研究顯示,突變mt

3、DNA的檢測(cè)可望成為腫瘤的非侵入性診斷的有效分子標(biāo)記。
　　 目的:分析良、惡性腹水中線粒體DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)ND3、16s rRNA、D-loop區(qū)突變情況,比較良、惡性腹水中mtDNA突變是否存在差異性。
　　 方法:臨床確診30例良、惡性腹水標(biāo)本,提取細(xì)胞總DNA。PCR方法擴(kuò)增mtDNAND3、16s rRNA、D-loop目的片斷,擴(kuò)增產(chǎn)物純化和測(cè)序。采用生物信息學(xué)方法分析