孕婦mtDNA A1555G突變位點的篩查.pdf

1、背景:聽力損傷是最常見的感覺器官障礙之一，在新生兒中的發(fā)病率為1‰，50％的耳聾患者是由遺傳因素引起的，其中約有1％的患者是由線粒體基因突變引起。線粒體基因突變可以導致個體對致聾環(huán)境因素易感性增加，其中以對氨基糖甙類抗生素易感性增加的線粒體DNA12SrRNA基因上的A1555G突變最為常見。該突變位點攜帶者在沒有使用氨基糖甙類抗生素時可以表現(xiàn)為正常聽力，在使用氨基糖甙類抗生素之后表現(xiàn)為對此類藥物敏感性增加，導致患者在使用正常劑量甚至微

2、小劑量的藥物時就可以發(fā)生重度甚至極重度的聽力損失。所以在孕婦中進行mtDNAA1555G突變位點的篩查具有重要的意義。
　　目的:通過對孕婦mtDNAA1555G突變位點的篩查，評估A1555G突變在孕婦中的攜帶頻率，為在我國孕婦中進行氨基糖甙類抗生素致聾相關的線粒體基因突變位點的篩查提供依據(jù)，對篩查陽性的孕婦檢測胎兒羊水細胞線粒體A1555G突變情況，確定胎兒基因型，為其今后用藥提供臨床指導。
　　方法:對2009年到20

3、10年來天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院做產(chǎn)前檢查的520名孕婦進行線粒體DNA12SrRNA基因上的1555位點突變情況進行檢測：應用酚-氯仿法提取全血DNA，PCR擴增目的片段，限制性內(nèi)切酶酶切擴增產(chǎn)物，對酶切陽性的產(chǎn)物直接測序，測序結果與標準線粒體DNA序列比較。對篩查陽性的患者在B超引導下行羊膜腔穿刺抽取羊水提取胎兒DNA，進行A1555G突變位點的檢測，確定胎兒基因型。
　　結果:520名受檢孕婦中有2名孕婦的PCR-酶切產(chǎn)物提示擴

4、增目的片段酶切位點消失，酶切產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳顯示741bp一條帶，PCR產(chǎn)物直接測序證實2名孕婦為A1555G同質性突變攜帶者，孕婦中A1555G突變攜帶者檢出率為0.38％，均為同質性突變，低于我國正常人群中0.7％的突變攜帶率，經(jīng)胎兒羊水細胞mtDNA檢測發(fā)現(xiàn)胎兒基因型與母親基因型完全相同。
　　結論:1.本研究通過對孕婦mtDNAA1555G位點突變的篩查在國內(nèi)首次得出該位點突變的攜帶頻率，且均為同質性突變，填補了該領域研