抗腫瘤基因疫苗和相應轉基因細胞模型的實驗研究.pdf

1、惡性腫瘤是當今世界嚴重威脅人類生命健康的致命殺手。隨著人們生活水平的提高，生活習慣的改變以及環(huán)境污染等因素，導致腫瘤發(fā)病率明顯上升。在當前的治療策略中，免疫治療成為新興的研究熱點，腫瘤疫苗成為一種治療惡性腫瘤的重要方法。本研究構建了包含人腫瘤抗原survivin和hCG8的兩種真核表達質粒，并獲得了這兩種基因的兩種轉基因細胞，在本研究中選用了雙順反子真核表達載體pIRESneo，該載體具有雙基因共表達的腦心肌炎病毒(ECMV)的內部核糖

2、位進入位點(IRES)相連處于同一啟動子控制下的腫瘤抗原基因和新霉素抗性基因Neo+，使翻譯過程中核糖體可以從不同位置進入而同時翻譯兩種蛋白質。另外，neo基因含有的氨基苷類抗生素(G418)抗性蛋白，經過G418篩選，幾乎所有存活的細胞克隆都能夠表達所轉染的目的基因，這就大大減小了從眾多抗藥克隆中篩選有功能單克隆的必要性，既節(jié)約了時間又減少了工作量。最終我們獲得了穩(wěn)定表達目的基因的細胞，為建立乳腺癌導向治療動物模型提供研究材料。