經(jīng)照射的單倍體相合供者淋巴細(xì)胞輸注抗小鼠黑色素瘤的效應(yīng)研究.pdf

1、目的：供者淋巴細(xì)胞輸注（DLI）作為一種過繼細(xì)胞免疫治療（ACI）重要手段，常與造血干細(xì)胞移植聯(lián)合，已被用于治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤和某些實(shí)體瘤，本研究在CB6F1小鼠→CC3HF1小鼠(F1→F1)輸注模型中，探討了單倍體相合供者淋巴細(xì)胞輸注的抗小鼠黑色素瘤效應(yīng)及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法：建立F1-F1單倍體相合輸注模型，以皮下接種B16-F10黑色素瘤細(xì)胞的CB6F1小鼠（表型為H-2b/d）為受者鼠，以CC3HF1小鼠（表型為H-

2、2d/k）為供者鼠。分為4組：PBS組：尾靜脈注射PBS；CTX組：環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide, CTX）化療+尾靜脈注射PBS；CTX+T細(xì)胞組：CTX化療+輸注經(jīng)照射供者鼠脾細(xì)胞中的T細(xì)胞部分；CTX+脾細(xì)胞組：C TX化療+輸注經(jīng)照射供者鼠脾細(xì)胞。觀察各組小鼠的腫瘤體積、體重、生存時(shí)間、瘤重等；檢測(cè)受者鼠體內(nèi)的供者淋巴細(xì)胞存活情況、淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞的數(shù)量變化；LDH法檢測(cè)宿主對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷能力；ELISA法檢測(cè)宿

3、主血清中IFN-γ、IL-2濃度變化，觀察各DLI組小鼠有無GVHD（移植物抗宿主?。┡R床癥狀及重要臟器的病理學(xué)變化。
　　結(jié)果：在腫瘤體積、中位生存時(shí)間、瘤重上，P BS組與C TX組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，CTX+T細(xì)胞組與 CTX+脾細(xì)胞組相比也無顯著差異（P>0.05）；各 DLI組的腫瘤體積小于PBS組（8.07±1.66cm3、8.24±1.45cm3 vs.10.84±1.11cm3， P<0.05），瘤重也小于PBS組（

4、8.19±0.82g、7.62±0.94 g v s.12.38±2.73g，P<0.05），小鼠中位生存時(shí)間長(zhǎng)于PBS組（31±3.286d、36±2.191d v s.19±0.548d，P<0.05）。各DLI組均未出現(xiàn)明顯GVHD。各DLI組的供者淋巴細(xì)胞于輸注后5天內(nèi)消失，但在輸注后第10天，宿主脾細(xì)胞仍對(duì)腫瘤細(xì)胞有較強(qiáng)的殺傷作用。各DLI組可有效增加細(xì)胞因子（IL-2、IFN-γ）的分泌，增加CD8+T細(xì)胞和NK細(xì)胞的數(shù)量。