橙皮苷的超濾提取及其酶法改性研究.pdf

1、我國(guó)柑桔資源豐富，是世界第二大生產(chǎn)國(guó)，其用于食用和藥用方面在我國(guó)有著悠久歷史。近來(lái)研究表明，柑桔中含具有多種抗氧化作用與保健功效的活性成份，是類黃酮等抗氧化物的重要來(lái)源之一。橙皮苷(Hesperidin)，是柑桔屬中含量豐富的一種類黃酮，在保護(hù)血管系統(tǒng)、消炎止痛、抑制癌細(xì)胞、抑菌等方面具有廣泛的報(bào)道。由于橙皮苷主要存在于加工或者鮮食后廢棄的柑桔果皮中，且溶解性較差，所以一直以來(lái)沒(méi)有得到有效的利用。本文系統(tǒng)研究了橙皮苷的超濾提取工藝、酶法

2、改性條件、改性物質(zhì)的純化和性質(zhì)鑒定，研究結(jié)果如下： (1)通過(guò)比較不同截留分子量、不同材質(zhì)的膜對(duì)超濾提取橙皮苷的效果后，選用30kD的聚丙烯腈平板超濾膜。確定了超濾提取橙皮苷的試驗(yàn)條件：在跨膜壓差為0.25MPa、溫度30℃、進(jìn)料流速為80L/h時(shí)，膜通量最大，最佳體積濃縮比為3.4。濾液分析結(jié)果表明：超濾對(duì)果膠去除率達(dá)到91.3％，橙皮苷的截留率為12.4％；透過(guò)液經(jīng)過(guò)一次結(jié)晶后得到的橙皮苷純度大于85％經(jīng)最后純化步驟得出的橙

3、皮苷純度在90％以上；采用0.1％NaOH和0.1％HCl先后對(duì)膜進(jìn)行混合清洗，通量基本得到恢復(fù)，純水透水率恢復(fù)系數(shù)r達(dá)到97％。 (2)單因素試驗(yàn)結(jié)果表明：反應(yīng)體系的pn值應(yīng)控制在6～8，反應(yīng)溫度應(yīng)控制在50～60℃，酶的最佳添加量為1000IU/g，反應(yīng)底物選擇糊精時(shí)，橙皮苷的轉(zhuǎn)化率最高，反應(yīng)時(shí)間為24h；在單因素的基礎(chǔ)上綜合分析認(rèn)為溫度、加酶量和pH為影響橙皮苷得率的主要因素，進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計(jì)，得到了溫度、加酶量和pH對(duì)橙皮

4、苷轉(zhuǎn)化率的回歸方程。通過(guò)響應(yīng)面分析得出：各因素中以加酶量對(duì)橙皮苷轉(zhuǎn)化率的影響最為顯著，因素間的交互作用較小，通過(guò)軟件優(yōu)化得出了酶法改性橙皮苷的最佳反應(yīng)條件即：溫度為55℃、pH值為7、加酶量為800IU/g，其對(duì)應(yīng)的響應(yīng)值(Y)為79.79％，通過(guò)驗(yàn)證試驗(yàn)得出模型預(yù)測(cè)數(shù)值可信度較高． (3)對(duì)比分析三種不同樹(shù)脂(D101、D296、HP-10)對(duì)橙皮苷的吸附特性。選擇HP-10樹(shù)脂進(jìn)行吸附試驗(yàn)；HP-10樹(shù)脂對(duì)橙皮苷的動(dòng)態(tài)飽和吸

5、附量為1844ug/mL濕樹(shù)脂，最佳吸附條件為：上樣液pH為10，流速為1.0mL/min；橙皮苷的最佳解吸條件：洗脫劑為50％乙醇，洗脫劑用量為300ml，洗脫流速為1.0mL/min：改性橙皮苷的最佳解吸條件：洗脫劑為70％乙醇，洗脫劑用量為300ml，洗脫流速為1.0mL/min。洗脫液濃縮后，分別再次上柱。純度鑒定試驗(yàn)得出：改性橙皮苷上層析柱后洗脫曲線和HPLC均為單一的峰，說(shuō)明是單一組分的純品，純度達(dá)92.3％，回收率為4.9