攜帶mda-7-IL-24和Plasminogen kringle 5雙靶向復(fù)制型溶瘤腺病毒的制備和體外抑瘤及安全性研究.pdf

1、華東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文攜帶mda-7/IL-24和Plasminogen kringle 5雙靶向復(fù)制型溶瘤腺病毒的制備和體外抑瘤及安全性研究姓名：張金合申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：戴平;劉新垣20060501S t u d i e s O n t h eP r e p a r a t i O n 、A n t i c a n c e r E f 艷c ta n d S a f b t y 0 ft h e

2、D o u b l e - T h r g e t i n g R e p l i c a t i v e A d e n o v i r u s w i t hm d a - 7 ／I L 一2 4a n d P l a s m i n o g e nK r i n g l e5 i nv i t r oA b s t r a c t ： O n c o l y t i c V i m s e s a r e ac l a s s o

3、 fp m m i s i n g a m i c a n c e ra g e n t s ，w h i c hr 印l i c a t e s c l e c t i v e l ym c a n c e rc e l l s a n dr e s u l t i n c a I l c e r - s p e c i f i cc y t o t o x i c i t y ．T W os t r a t e g i e s h

4、a V e b e e n e m p l o y e d t o c o n s t m c t o n c 0 1 y t i c v i m s ． O n e i s t o u s em m o r - s p e c 訪c p r o m o t e r s t o c o n 廿0 l t h e e x p r e s s i o n o f 、，i r a l g e n e s e s s e n t i a l f

5、 o rr 印l i c a t i o n ，s u c h a sa d e n o “r a l E 1 A g e n c ．O u rL a bc o n s t m c t e d an o v e lo n c o l y t i ca d e n o “m sA d ．T E R Tb yr 印l a c i n gm e n o m a lE 1 A p r o m o t e r 謝t l lh T E R T p

6、r o I n o t e LT h e o t l l e r 姍a t e g yt oc o n s t n l c to n c o l y t i ca d e n o v i m si s t o d e l e t c f u n c t i o ng e n e sm a ta r e n e c e s s a r yf o re m c i e n tv i r a l r e p l i c a t i o ni

7、1 1n o r n l a lc e l l s ，b u tn o t i nt u I r l o rc e l l s ．O u rL a b a l s oc o n s t m c t e da 1 1o n c 0 1 州c a d e n o v i m s —Z D 5 5 一g c n eb y d e l e t i n ga d e n o v i r a lE 1 B5 5 l 江) a g e n e ．B

8、o mc o n s 饑I c t e d c a I l c e r - s p e c i f i c o n c 0 1 y t i c a d e n o v i n l s e sd e m o n s n a t ep o t c I l ta n t i t 啪0 m l e 伍c a c y 擁v f v 0 a l l i I I l a le x p e r i m e n t s ．T 0 f 礬h e ri m

9、p r o V en l e a I l t i c a n c c re 伍c a c yo fo n c 0 1 ”i cv i m s ，a n e w s t r a t e g yn a n l e dg e n e —V i r u st h e r 印yo fc a n c e r 、】l ，勰p u t f b n v a r d ．B r i e n y ，a 1 1 t i t u m o r a l g e n e

10、 i sc l o n e d t o 幽eo n c o l ”i c 、，i m s ．W i mt h e r e p l i c a t i o n o fv i m s ，t l l e e x p r e s s i o n o fa n t №r a lg e n ei sg r e a t l yi n c r c a s e d ．A tt l l es 鋤e t i n l e ，t h eo n c o l y t

11、 i cv i n l s i t s e l f h a sp o t e n t 刪t I l m o r a le 威c a c y ．I no r d e rt o i I n p m V e 廿l es a f 亂ya 1 1 d 舭t i c a I l c e re 丘b c t o fo n c 0 1 y t i c v i m s ， w e c o n s t n l c t e d a n o m e r n o

12、 v e l o n c o l y t i c a d e n o v i m s —T D 5 5 b yr e p l a c i n gt h en o m l a lE 1 A p r o m O t e rw i m h T E R T p r o m o t e ra n dd e l c t i n ga d e n o v i r a lE 1 B 5 5 k D a g e n e ．T 哪o r a l l g i

13、 o g e n e s i sp l a y si m 】塒t 踟吐r o l e si nt u m o r d e v e l o p m e n ta 1 1 dm e t a s t a s i s ．I n m ep r e s e n ts t u d y ，h u m 蛆p l a s m i n o g e nk r i n 9 1 e5 a n dM d a - 7 仃L 一2 4w e r ci n s e n e

14、 di m oT D 5 5 ，r e s m t i n g i n s e r i e s o fr e c o m b i m n ta d e n o v i n l s e s ，s u c h a s T D 5 5 一K 5 、T D 5 5 扎- 2 4 a n d T D 5 5 扎一2 4 一K 5 ．B e c a u s e K 5 c a I li 出b i t t h ea I l g i o g e n e

15、 s i s ，a I l d I L 一2 4c a n s p e c m c a l l y i n d u c e t 1 1 e t l l m o r c e l l s 叩o p t o s i s 姐d i 1 1 1 1 i b “孤g i o g e n e s i s ．S o也e o 刪c a l l y ，m e m e m p y r e s u l t o f t h e T D 5 5 s y s t e

16、 m 、v i m m e s e r e c o m b m a n ta d e n o 、，i m s e ss 1 1 0 u l db e b e t t e rt 量l 觚t l l a to f g e n e m e r a p y o ro n c o l y t i cn l e r 印y ，a n dc a np r o v i d e a9 0 0 d p l a t f b m l f - o r t 1 1

17、e s p e c i f i c g e n e 一啊m s t l l e r a p y o f c a n c e L T h ee X p e r i m e n t sw i m t 1 1 I n o rc e l l ss u g g e s t e dt h a tm ed u a l - t a r g e t i n gg e n eV i m s 廿l e r 印yi ss a f e ra 1 1 dm o r