攜帶抑瘤基因IL-24的rDNA區(qū)靶向載體構建及抑瘤效果的初步驗證.pdf

1、中圖分類號UDC碩士學位論文學校代碼密級攜帶抑瘤基因IL24的rDNA區(qū)靶向載體構建及抑瘤效果的初步驗證ConstructionofrDNATargetingVectorCarr“TumorSnGeneIL一‘andcarryinglumorSuppressorene24and—PreliminaryVerificationfortheInhibitoryEffect作者姓名：寸金濤學科專業(yè)：遺傳學學院(系、所)：醫(yī)學遺傳學國家重點實驗

2、室導師：梁德生教授指導小組：劉雄吳副教授鄔玲仟教授夏家輝院士論文答辯日期塑墾：墨：塹答辯委員會主中南大學二。一三年五月碩士學位論文中文摘要攜帶抑瘤基因IL24的rDNA區(qū)靶向載體構建及抑瘤效果的初步驗證摘要近年來，隨著人類對腫瘤免疫、腫瘤病因及分子機制等研究的深入，腫瘤基因治療獲得了突飛猛進的發(fā)展，并逐漸走向成熟，獲準進入臨床試驗的基因治療藥物逐年增多。其中載體和治療基因的選擇是其成功的關鍵；目前大部分基因治療研究的載體都集中于病毒載體

3、，我室從對雙隨體小染色體的研究出發(fā)，構建了一種非病毒人源基因載體系統(tǒng)——核糖體基因區(qū)靶向載體(pHrneo)，其后又改進構建了pHr2載體系統(tǒng)。我們前期研究結果表明該載體系統(tǒng)能在細胞內安全且穩(wěn)定表達外源基因。IL一24是一個既能抑制腫瘤生長，又可調節(jié)免疫系統(tǒng)的基因。多項研究顯示IL24具有廣泛的抗腫瘤作用，所以利用該載體結合IL24可能會是腫瘤基因治療的一個新策略。目的：以pHrneo和pHr2兩個載體構架為基礎，構建能在細胞內穩(wěn)定表達

4、有生物學活性的工L一24蛋白的核糖體基因區(qū)靶向載體，并擬利用該載體對腫瘤的基因治療進行探究。方法：1載體的構建：PCR分別擴增IL一24基因、CMV啟動子和CAG啟動子后連入pEGFP—N1質粒，構成與EGFP融合或者非融合表達框，再分別連入pHrneo和pHr2構架，構建出分別以CMV和CAG為啟動子的兩套質粒。2構建完成的質粒用磷酸鈣轉染法轉染293細胞，觀察熒光表達情況并通過ELISA檢測IL一24蛋白的表達情況。3G418篩選轉