T7 RNA聚合酶催化的熒光擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)結(jié)直腸癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞及其臨床意義.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文T7RNA聚合酶催化的熒光擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)結(jié)直腸癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞及其臨床意義姓名：朱自滿申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)（普外）指導(dǎo)教師：李世擁20080501第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文細(xì)胞，同時(shí)檢測(cè)患者血清中的CEA、CAl99、CA242，并對(duì)結(jié)直腸癌組織進(jìn)行免疫組化染色，檢測(cè)結(jié)直腸癌組織中的P53、nm23H一1表達(dá)的變化，分析外周靜脈血中循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢出與患者臨床病理因素的關(guān)系。對(duì)術(shù)前陰性的患者術(shù)后重新檢測(cè)其外周

2、血中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞，部分患者術(shù)后早期化療，化療結(jié)束后再次檢測(cè)其外周血中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞。研究結(jié)果1本研究成功建立了T7RNA聚合酶催化的熒光擴(kuò)增法檢測(cè)結(jié)直腸癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞技術(shù)，即：CellularFACTT；以CEA為循環(huán)腫瘤細(xì)胞標(biāo)志物，使用CellularFACTT檢測(cè)體外模型中的結(jié)直腸癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞，其敏感度為最低可從最低可從107個(gè)有核細(xì)胞中檢出5個(gè)癌細(xì)胞，特異度為967％。2CellularFACTT檢測(cè)68例結(jié)直腸癌患者術(shù)前外周

3、血中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞，51例陽性，總陽性率為75％；3結(jié)直腸癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢出與TNM分期、腫瘤細(xì)胞分化程度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移狀況密切相關(guān)；4結(jié)直腸癌患者外周血中CEA、CA242、CAl99陽性率分別是353％、265％、324％，cEA、CA242、CAl99陽性的患者其循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢出率是833％、722％、773％，結(jié)直腸癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢出與CEA、CA242、CAl99無關(guān)；517例術(shù)前檢測(cè)陰性的患者于根治性手術(shù)

4、后24小時(shí)再次檢測(cè)，13例陽性，陽性率為765％；6。12例陽性患者于術(shù)后早期接受同一方案化療，化療結(jié)束后再次檢測(cè)，4例陽性，陽性率為333％；7免疫組化檢測(cè)p53、nm23H一1在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)，陽性率分別為574％、50％、456％，外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢出與結(jié)直腸癌組織中nm23H一1的表達(dá)密切相關(guān)。研究結(jié)論1建立CellularFACTT方法，將抗體特異性和T7RNA聚合酶的敏感性相結(jié)合，檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞，方法可行，可從1