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文檔簡介
1、目的:通過體外建立并比較不同“多種生長因子復(fù)合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)”,尋找促進(jìn)人胚肺成纖維細(xì)胞生長增殖分化最佳釋放系統(tǒng)。
方法:測定培養(yǎng)基中“纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)”釋放曲線,加入生長因子復(fù)合物(PDGF、TGF、VEGF、EGF),建立“多種生長因子復(fù)合物纖維蛋白凝膠釋放系統(tǒng)”。取傳至3~5代人胚肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng),分為有生長因子實(shí)驗(yàn)組A和無生長因子對照組B兩組,每組分4亞組:①纖維蛋白凝膠全覆蓋組(A1、B1組)②纖維蛋白原
2、全覆蓋組(A2、B2組)③島狀凝膠組(A3、B3組)④碎片狀凝膠組(A4、B4組),設(shè)置無凝膠對照組C:生長因子組(C1組)、無生長因子組(C2組)。連續(xù)觀察7~14天,觀察細(xì)胞形態(tài),測定細(xì)胞數(shù),并用MTT法測定相對細(xì)胞活性,觀察比較不同釋放系統(tǒng)對細(xì)胞生長增殖的影響。
結(jié)果:(1)不同凝膠釋放系統(tǒng)釋放曲線的差異:島狀與碎片狀組凝膠釋放無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),纖維蛋白凝膠全覆蓋組與島狀、碎片組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001)
3、,全覆蓋組釋放高峰落后于島狀和碎片狀組。(2)A1、A2、B1、B2組均無細(xì)胞生長,A3、A4、B3、B4組細(xì)胞生長良好,增殖活躍。(3)凝膠內(nèi)帶細(xì)胞生長增殖最慢,外帶最快,中帶介于兩者之間。隨著凝膠溶解,細(xì)胞向內(nèi)帶遷移,增殖速度逐漸增快。(4)生長因子組細(xì)胞增殖速度明顯快于無生長因子組(P<0.001)。(5)生長因子組細(xì)胞生長情況:A4組優(yōu)于A3組及C1組,A3組優(yōu)于C1組(P<0.001);無生長因子細(xì)胞生長情況:B4組優(yōu)于B3、
4、C2組,而C2組生長情況優(yōu)于B3組(P<0.001)。(6)細(xì)胞增殖情況評估細(xì)胞計(jì)數(shù)法和MTT法測得OD值存在一定線性關(guān)系,并呈正相關(guān)關(guān)系(生長因子組:A3組r=0.929,P<0.001;A4組r=0.863,P<0.001;C1組r=0.716,P<0.005。無生長因子組:B3組r=0.706,P<0.005;B4組r=0.423,P<0.05;C2組r=0.512,P<0.05)。
結(jié)論:1、多種生長因子復(fù)合物纖維蛋白
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