拉米夫定耐藥患者的臨床特點及耐藥毒株的分子病毒學研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、隨著以拉米夫定為代表的新一代核苷類似物在中國慢性乙型肝炎患者中的廣泛應用,核苷類似物耐藥成為目前臨床關注的焦點問題.我們采用本室先前建立的RFLP方法篩檢YMDD變異并將其應用于臨床監(jiān)測拉米夫定治療過程中耐藥性的產生,取得了較好的效果.由于RFLP的局限性,我們對篩檢YMDD變異陽性的標本進行了P基因測序,以進一步了解拉米夫定耐藥株的P基因A-E區(qū)序列特點.該研究中還有2例患者中分別因為P基因rtD83N和rtM204I變異導致HBsA

2、g的表達提前出現終止,但患者仍表現為HBsAg陽性,說明在患者中這種提前終止的變異株均與野毒株同時存在.為進一步研究變異毒株的生物學意義,我們通過定向點突變,成功的在模板P3.8Ⅱ的基礎上構建了五種P基因變異株,并在此基礎上將包含不同突變點的全基因質粒通過磷酸鈣轉染的方法轉染HepG2細胞.通過轉染細胞上清的檢測結果發(fā)現,五種不同的P基因變異株均可表達并分泌HBsAg和HBeAg,證明轉染質粒在細胞內可正常表達和分泌,但五種變異株與野株

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