MLPA結合RT-PCR快速檢測乙型肝炎病毒拉米夫定及阿德福韋耐藥.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)耐藥的產生成為長期治療慢性乙型肝炎成功與否的主要障礙。目前檢測HBV耐藥的方法多種多樣,但都因存在一些缺陷,其臨床應用受到限制,例如靈敏度低、耗時長、成本高等缺點。在本論文中,我們建立了一種可以同時檢測HBV拉米夫定(lamivudine, LAM)及阿德福韋(adefovir, ADV)耐藥突變株(rtM204V, rtM204I, rtA181T, rtA181V, rtN2

2、36T)的多重連接探針-實時熒光PCR( multiplex ligation-dependent probe real-time PCR, MLP-RT-PCR)方法。該方法結合了多重連接探針擴增(multiplex ligation- dependent probe amplification,MLPA)技術的靈敏、特異、高通量和實時PCR方便快捷、實時檢測的特點。通過檢測臨床116例慢性乙肝患者DNA樣本對MLP-RT-PCR方法

3、進行了方法性能評價,其中檢測出LAM耐藥突變41例(35.3％),ADV耐藥突變17例(14.7%)及兩者共同耐藥突變5例(4.3%)。
　　檢測結果與金標準直接測序方法比較,MLP-RT-PCR檢測rtM204V、rtM204I、rtA181T、rtA181V和rtN236T的符合率分別為95.7%(111/116)、98.3%(114/116)、99.1%(115/116)、98.3%(114/116)和99.1%(115/1

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