雙黃連藥物代謝的分子機制.pdf

1、雙黃連是由金銀花、黃芩、連翹組成的中藥復方制劑，它們的主要成分為綠原酸、黃芩苷、連翹苷，主要用于外感風熱引起的發(fā)熱、咳嗽及多種上呼吸道感染等病癥。本文通過體外和體內試驗，分別探討了雙黃連各主要成分間相互作用的分子機理及其對肝臟的保護作用。 體外試驗:通過膠原酶兩步灌流法獲取大鼠原代肝細胞，用不同濃度的雙黃連及其主要成分綠原酸、黃芩苷、連翹苷處理24h～72h，Western Blot法檢測肝細胞中CYP3A1的表達。結果顯示:每

2、只大鼠可獲得(2～4)×108個肝細胞，成活率在95％左右，培養(yǎng)的肝細胞形態(tài)完整、生長良好，可用于藥物代謝的研究。綠原酸在24h內對肝細胞CYP3AI無誘導作用，但處理48h、72h后CYP3A1的表達隨藥物濃度的增加而呈上升趨勢。連翹苷作用24h～72h后，肝細胞CYP3A1的表達隨藥物濃度的增加呈遞增的趨勢，作用時間越長，表達越明顯；10μM連翹苷作用72h對肝細胞CYP3A1的誘導作用最強。黃芩苷作用24h～72h后，肝細胞CYP

3、3A1的表達隨藥物濃度的增加呈遞增的趨勢，10μM黃芩苷對肝細胞CYP3A1的誘導作用最強。綠原酸、黃芩苷、連翹苷兩兩配伍后處理肝細胞24h～48h，CYP3A1的表達與藥物的濃度和作用時間呈正相關。雙黃連處理肝細胞24h～48h后，CYP3A1的表達隨藥物濃度的增加呈上升趨勢，相同濃度梯度下，48h比24h明顯，且100μM的雙黃連對CYP3A1的誘導作用最強。 體內試驗:將50只SD大鼠隨機分成5組(每組10只):空白對照組

4、(給予生理鹽水)和雙黃連處理組(劑量分別為100mg/kg、200mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg)，每天腹腔注射一次，連用7天，處死大鼠，檢測血清中ALT、AST、LDH、GSH及肝組織勻漿中MDA、SOD的含量，HE染色觀察肝組織病理形態(tài)學的改變。結果顯示:各組大鼠的ALT、AST、GSH、LDH、MDA、SOD的活力及肝病理形態(tài)學觀察均正常。另取40只SD大鼠隨機分成4組(每組10只):對照組和對乙酰氨基酚(APA

5、P)模型組給予生理鹽水，陽性藥物組給予甘利欣，雙黃連處理組給予200mg/kg雙黃連，每天腹腔注射一次，連續(xù)7天，末次給藥8h后，除空白對照組外其余各組均腹腔注射300mg/kg APAP，對照組給予等體積生理鹽水，禁食不禁水，16h后處死動物，檢測血清中ALT、AST、TP的含量，HE染色觀察肝組織病理形態(tài)學的變化。結果顯示:與模型組相比，雙黃連處理組大鼠血清中ALT、AST水平顯著降低，TP的含量顯著升高(P<0.01)。模型組大鼠

6、肝臟顏色變淺，表面略顯粗糙，質脆，肉眼可見細小顆粒，肝小葉正常結構破壞，肝索解離，排列紊亂，脂肪變性較重，炎性細胞浸潤明顯，有充血現(xiàn)象。雙黃連處理組與模型組相比，肝組織病理性改變較模型組明顯減輕，脂肪變性減少，偶見充血，少見炎性細胞浸潤。 以上結果表明:雙黃連及其有效成分綠原酸、黃芩苷、連翹苷均對大鼠肝細胞CYP3A1具有誘導作用。綠原酸、黃芩苷、連翹苷兩兩配伍后，對大鼠肝細胞CYP3A1誘導作用增強。雙黃連對肝臟的毒性小，并能