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文檔簡介
1、細菌已經(jīng)進化成了相當成熟的機制用以監(jiān)測,適應環(huán)境,然后對宿主給與的防御機制以致命的攻擊。對與病原菌來說,它們已經(jīng)演生出了各種毒力因子以及其調(diào)控系統(tǒng)來適應宿主的內(nèi)生境,從而確保它們在宿主體內(nèi)的生存。一種在許多細菌中共存的調(diào)控系統(tǒng)—雙元調(diào)控系統(tǒng)近幾年來被廣泛關注。在本實驗中,作者也詳細研究了豬2型鏈球菌中的一個新型雙元系統(tǒng)resS-resR,試圖了解它如何調(diào)節(jié)豬2型鏈球菌的毒力因子,代謝基因和怎樣適應宿主體內(nèi)的惡劣內(nèi)生境的。
2、作者對2型豬鏈球菌(Streptococcus suis2)的一個新型的雙元調(diào)控系統(tǒng)(TCS)resS-resR進行了詳細的結(jié)構和功能上的分析。為了檢測resS-resR雙元系統(tǒng)對細菌致病力的作用,作者構建了三個缺失突變株△resR,△resS,△resS/R和它們相應的回復互補菌株△resR-pAT18resR,△resS-pAT18resS,△resS/R-pAT18resS/R。作者比較了它們和野毒株之間的生化特性,基因表達量和毒
3、力強弱等?!鱮esS/R雙缺失表現(xiàn)出了一系列的表型變化,包括溶血性的幾乎完全喪失和下降的唾液酸含量。在細胞實驗中,相較于野毒株而言,三個缺失突變株都對Hep-2細胞表現(xiàn)出了黏附力的下降。各個菌株的相對毒力也在CD1實驗老鼠上進行了比較。在小鼠LD50實驗中,△resS/R雙缺失菌株組的值較之野毒株組增加了2個log值。在小鼠組織感染實驗中,同樣以野毒株組為對照,△resS/R雙缺失菌株組表現(xiàn)出毒力明顯下降,臨床和病理學檢測的差異也很大。
4、另外兩個突變株組的現(xiàn)象卻與野毒株差別不大。在用real-time PCR進行體內(nèi)體外檢測△resS/R雙缺失菌株組中基因表達量時,sly、mrp和ef等主要毒力因子的表達量下降明顯。這都說明resS-resR雙元系統(tǒng)對2型豬鏈球菌的毒力至關重要。
實驗證據(jù)表明了△resS/R雙缺失突變株對宿主體內(nèi)的惡劣內(nèi)生境接受的信號不再那么強烈,反應不再敏感,從而表現(xiàn)出了一些重要的生化指標上的缺失,喪失了溶血活性,在細胞實驗中降低了黏附
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