磁性骨髓間充質干細胞靶向治療大鼠脊髓損傷模型的活體示蹤.pdf

1、目的:設計一種新型的磁性靶向投遞系統(tǒng)，將SPIO標記BMSCs，通過蛛網(wǎng)膜下腔移植，并在脊髓損傷區(qū)水平外置一小型磁鐵，提高BMSCs靶向脊髓損傷區(qū)的遷移率，同時利用MR分子成像技術來示蹤磁標干細胞的遷徙、分布及歸巢情況，為BMSCs移植治療脊髓損傷提供了一種新的思路和手段。
　　 方法:分離培養(yǎng)SD大鼠骨髓間充質干細胞，用SPIO標記BMSCs并檢測其生物學特性;體外磁鐵實驗檢測標記細胞的磁靶向性，通電螺旋線圈測定實驗所需的最小

2、磁場強度并選擇實驗所需的磁鐵形狀;建立脊髓損傷模型，制作組織形態(tài)學標本進行HE染色觀察脊髓損傷情況，蛛網(wǎng)膜下腔移植磁標干細胞并在脊髓損傷水平外置磁鐵，磁共振分子成像觀察磁標干細胞的歸巢情況，組織切片普魯士藍染色檢測達到靶點的磁標干細胞。
　　 結果:SPI(0)標記SD大鼠骨髓間充質干細胞效率高，標記率幾乎達100％，臺盼藍染色顯示磁標干細胞組的活力與未標記干細胞組相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，CCK-8法檢測發(fā)現(xiàn)磁標干

3、細胞組的增殖活力與未標記干細胞組相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。體外磁鐵實驗證明磁標細胞具有特異的磁靶向性，通電螺旋線圈測定的實驗所需最小磁場強度為0.0720T(720GS)，階梯狀磁鐵可使靶區(qū)磁標干細胞分布均勻，有利于脊髓損傷的修復。HE染色顯示脊髓損傷區(qū)可見大量空洞及紅細胞，未損傷區(qū)未見明顯空洞形成。磁共振成像顯示細胞移植后1-4周磁鐵組T2*WI脊髓內均可見明顯低信號影，非磁鐵組3周后T2*WI脊髓內出現(xiàn)點狀低信號影，而對

4、照組1-4周T2*WI脊髓內均未見低信號影。運動功能BBB評分顯示磁鐵組大鼠的功能恢復明顯高于非磁體組及對照組。普魯士藍染色示磁鐵組細胞移植后1-4周均可見大量藍染細胞，胞漿藍染、核紅染，非磁鐵組2周后可見少量藍染細胞，對照組1-4周均未見藍染細胞。
　　 結論:在外加磁場的作用下，SPIO標記的BMSCs能準確靶向投遞到脊髓損傷區(qū)，增強了BMSCs靶向遷徙的特異性，提高BMSCs靶向歸巢的遷移率及脊髓損傷區(qū)細胞數(shù)量;利用臨床高