長鏈非編碼RNA MALAT-1及其與鋅指蛋白轉錄因子Snail在腎細胞癌中表達及相關性的研究.pdf

1、目的:腎細胞癌(renal cell carcinoma，RCC)是泌尿生殖系統(tǒng)中常見惡性腫瘤之一，是起源于腎實質(zhì)泌尿小管上皮系統(tǒng)的一種常見腎臟惡性腫瘤，約占成人惡性腫瘤的2％～3％，占腎臟原發(fā)惡性腫瘤的80％～90％[1]。近年來由于腎癌早期癥狀不明顯且無特異性的特點使其死亡率呈現(xiàn)上升的趨勢。目前腎癌的發(fā)生及發(fā)展的分子機制尚未清晰，放化療對其治療效果不佳，雖然根治性的腎切除手術仍是目前最有效果的治療方法，然而近30％局限性腎癌患者在治

2、療后出現(xiàn)腫瘤復發(fā)[2]。腫瘤的復發(fā)、轉移仍是威脅患者生命的主要因素。目前除影像學檢查結果外尚缺乏早期的實驗室診斷指標，使得對腎癌早期發(fā)現(xiàn)早期診斷及治療具有一定的難度。為提高腎癌患者的治療效果，尋找新的腎癌早期診斷、判斷預后的生物標志物并深入研究其在腎癌的發(fā)生發(fā)展中的作用具有重要意義。
　　長鏈非編碼RNA在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用已越來越明顯，可在多個水平上調(diào)控基因的表達，參與腫瘤的生長、侵襲及轉移。而其中的MALAT-1在人類多種腫

3、瘤組織中異常表達，其異常高表達改變了腫瘤細胞的生物學表型，促使腫瘤細胞增殖能力提高，轉移能力和侵襲能力增強，促進了腫瘤的發(fā)生發(fā)展。通過對乳腺癌的預測及篩選發(fā)現(xiàn)MALAT-1受上游轉錄因子Snail、sox-5、FOXQ1和RUNX1的調(diào)控，同時又可調(diào)控下游hsa-miR-320a的表達，所以MALAT-1與Snail共同作為“促癌基因”在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起到至關重要的作用。本課題以腎癌為研究對象，檢測MALAT-1與其上游轉錄因子S

4、nail在腎癌新鮮離體癌及正常腎組織中的表達，探討MALAT-1與腎癌及Snail與腎癌之間的相關性、MALAT-1與Snail的相關性以及其可能的作用機制。
　　方法:
　　應用逆轉錄-聚合酶鏈反應(reverse transcription polymerase chainreaction, RT-PCR)技術分別檢測58位腎細胞癌患者癌及正常腎組織中LncRNAs重要成員MALAT-1與其上游轉錄因子Snail的各自轉

5、錄水平，探討各自在腎癌和正常腎組織中的表達關系，以及MALAT-1與Snail之間的相關性。
　　結果:
　　1.1腎細胞癌(RCC)組織中MALAT-1基因mRNA表達情況
　　MALAT-1基因mRNA在腎細胞癌和正常腎組織中的表達量分別為1.08±0.26和0.84±0.27，腎細胞癌組織中MALAT-1基因的mRNA表達量明顯要高于正常腎組織，兩者的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。分別對性別、年齡、腫瘤大小及

6、TNM分期進行分組統(tǒng)計分析得出MALAT-1在腎細胞癌中的表達與性別（男性組與女性組）、年齡（＜60與≥60）、腫瘤大小(≤7cm與＞7cm)以及TNM分期（Ⅰ+Ⅱ與Ⅱ+Ⅳ）均無關(P＞0.05)。
　　1.2腎細胞癌(RCC)組織中Snail基因mRNA表達情況
　　Snail基因mRNA在腎細胞癌和正常腎組織中的表達量分別為0.83±0.26和0.61±0.33，腎細胞癌組織中Snail基因的mRNA表達量明顯要高于正常

7、腎組織，兩者的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。分別對性別、年齡、腫瘤大小及TNM分期進行分組統(tǒng)計分析得出Snail在腎細胞癌中的表達與性別（男性組與女性組）、年齡（＜60與≥60）、腫瘤大小(≤7cm與＞7cm)以及TNM分期（Ⅰ+Ⅱ與Ⅲ+Ⅳ）均無關（P＞0.05）。
　　2 MALAT-1基因mRNA與Snail基因mRNA在人腎細胞癌(RCC)中相對表達量之間的關系
　　MALAT-1基因mRNA在腎細胞癌中相對表達量

8、與Snail基因mRNA在腎細胞癌中相對表達量分別經(jīng)正態(tài)性檢驗符合正態(tài)分布，再行直線相關統(tǒng)計方法得出MALAT-1基因mRNA與Snail基因mRNA在人腎細胞癌（RCC）中的相對表達量成正相關（r=0.396，P=0.003＜0.01）。
　　結論:
　　1 MALAT-1基因在腎細胞癌組織中的相對表達量明顯高于正常腎組織，提示MALAT-1基因的異常表達與腎細胞癌的發(fā)生發(fā)展有關，而與患者性別、年齡、腫瘤大小及臨床分期等因

9、素無關。
　　2 Snail基因在腎細胞癌組織中的相對表達量明顯高于正常腎組織，提示Snail基因的異常表達與腎細胞癌的發(fā)生發(fā)展有關，而與患者性別、年齡、腫瘤大小及臨床分期等因素無關。
　　3通過本研究的檢測發(fā)現(xiàn)MALAT-1和Snail在腎細胞癌組織中表達水平均顯著上調(diào)，MALAT-1和Snail之間存在著正相關，Snail作為MALAT-1的上游轉錄調(diào)控因子，可能調(diào)控MALAT-1基因發(fā)揮促進腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用，Snai