參附對休克大鼠血清培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞TM和EPCR表達(dá)的影響.pdf

1、目的： 探討參附注射液對失血性休克大鼠血清培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)中血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)、內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(EPCR)表達(dá)的影響。 方法： 1.將50只SD大鼠隨機(jī)分為正常對照組、假休克組、失血性休克組、林格注射液治療組(林格組)、林格注射液加參附注射液治療組(參附組)。除對照組外，其余大鼠均放血至40 mmHg60分鐘，然后休克組不復(fù)蘇，林格液組用3倍失血量的林格液復(fù)蘇；參附組用含參附注射液(10

2、ml/kg)和林格液組成的3倍失血性的液體復(fù)蘇。復(fù)蘇后3小時(shí)取血。 2.留取正常對照組、假休克組、失血性休克組、林格注射液治療組(林格組)、林格注射液加參附注射液治療組(參附組)血清，并將胎牛血清作為正常對照組，無菌處理后加入到培養(yǎng)基，與內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)18小時(shí)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、WESTERN BLOT技術(shù)分別檢測各組可溶性TM(sTM)、可溶性EPCR(sEPCR)水平及TM

3、、EPCR mRNA及蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果： 1.與假休克組(72.8±9.4)比較，休克組(90.9±11.4)和林格組(88.1±12.4) sTM含量均增高(P均<0.05)。與假休克組(155±15)比較，休克組(284±11)和林格組(281±16) sEPCR含量均增高(P均<0.05)。與林格組(88.1±12.4)比較，參附組(74.6±10.8)sTM含量均下降(P<0.05)。與林格組(281±16)

4、比較，參附組(144±13) sEPCR含量下降(P<0.05)。休克組(90.9±11.4，284±11)及林格組(88.1±12.4，281±16)的sTM、sEPCR含量均無明顯差異(P均>0.05)。 2.與假休克組(0.368±0.023)比較，休克組(1.074±0.065)和林格組(1.037±0.054) TM mRNA含量均增高(P均<0.05)。與假休克組(0.869±0.048)比較，休克組(1.862±0

5、.079)和林格組(1.800±0.069) EPCR mRNA含量均增高(P均<0.05)。與林格組(1.037±0.054)比較，參附組(0.396±0.028) TM mRNA含量下降(P<0.05)。與林格組(1.800±0.069)比較，參附組(0.921±0.057) EPCR mRNA含量下降(P<0.05)。休克組(1.074±0.065，1.862±0.079)及林格組(1.037±0.054，1.800±0.069)

6、的TM、EPCR mRNA含量均無明顯差異(P均>0.05)。 3.與假休克組(1.405±0.238)比較，休克組(0.869±0.105)和林格組(0.911±0.132) TM蛋白含量均下降(P均<0.05)。與假休克組(1.075±0.208)比較，休克組(0.702±0.147)和林格組(0.739±0.155) EPCR蛋白含量均下降(P均<0.05)。與林格組(0.911±0.132)比較，參附組(1.419±0.

7、219) TM蛋白含量增高(P<0.05)。與林格組(0.739±0.155)比較，參附組(1.089±0.217) EPCR蛋白含量增高(P<0.05)。休克組(0.869±0.105，0.702±0.147)及林格組(0.911±0.132，0.739±0.155)的TM、EPCR蛋白含量均無明顯差異(P均>0.05)。 結(jié)論： 1.參附注射液可以從基因、蛋白水平影響失血性休克大鼠血清培養(yǎng)的HUVEC的TM及EPCR