結(jié)直腸癌中CD133+細(xì)胞與血管生成及VEGF之間關(guān)系的研究.pdf

1、目的：(1)研究94例結(jié)直腸癌組織標(biāo)本中CD133、血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)及其與臨床病理特征之間的關(guān)系，探討CD133表達(dá)與腫瘤微血管密度(MVD)、VEGF表達(dá)之間的相關(guān)性。
　　 (2)從結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480中分離CD133+細(xì)胞并檢測內(nèi)皮細(xì)胞對CD133+細(xì)胞表達(dá)VEGF的影響。
　　 方法：(1)采用免疫組織化學(xué)SP兩步法和組織芯片技術(shù)檢測94例結(jié)直腸癌標(biāo)本中CD133、VEGF、CD31的表達(dá)情況。
　

2、　 (2)分別利用免疫磁珠分選技術(shù)和無血清懸浮培養(yǎng)法富集CD133+細(xì)胞。將SW480細(xì)胞或磁珠分選CD133+細(xì)胞分別在6種培養(yǎng)條件下進(jìn)行培養(yǎng)，利用免疫組織化學(xué)法檢測六組細(xì)胞在培養(yǎng)不同時間后CD133及VEGF的表達(dá)。
　　 結(jié)果：(1)結(jié)直腸癌中CD133的表達(dá)與腫瘤的分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜0.05)。
　　 (2)結(jié)直腸癌組織中CD133的表達(dá)與VEGF表達(dá)及MVD呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。
　　 (3)結(jié)直

3、腸癌組織中微血管密度按CD133-/VEGF-,+→CD133+/VEGF-,+→CD133+/VEGF++,+++→CD133-/VEGF++,+++的順序逐漸增加。
　　 (4)在含血清培養(yǎng)基或無血清培養(yǎng)基中，與內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)的SW480細(xì)胞CD133+細(xì)胞比率與不添加內(nèi)皮細(xì)胞者比有所增加(P＜0.05)。
　　 (5)在無血清培養(yǎng)基中，SW480細(xì)胞和CD133+細(xì)胞添加內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)后CD133+細(xì)胞表達(dá)VEGF的

4、比率顯著增加(P＜0.01)。
　　 (6)在培養(yǎng)不同時間后，六組不同培養(yǎng)條件下的細(xì)胞中CD133陽性細(xì)胞比率和VEGF陽性細(xì)胞比率之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。
　　 結(jié)論：(1)結(jié)腸癌中內(nèi)皮細(xì)胞可能促進(jìn)結(jié)腸癌干細(xì)胞的自我更新。
　　 (2)內(nèi)皮細(xì)胞可能通過誘導(dǎo)結(jié)腸癌干細(xì)胞表達(dá)VEGF來促進(jìn)血管的發(fā)生。
　　 (3)CD133+細(xì)胞可能是通過自分泌或旁分泌VEGF的方式促進(jìn)血管新生，微血管密度增加則促進(jìn)CD133+