小鼠次級(jí)淋巴樣組織趨化因子真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其體內(nèi)外趨化功能的研究.pdf_第1頁
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1、該論文的工作意在克隆小鼠次級(jí)淋巴樣組織趨化因子（SLC）基因,并構(gòu)建其真核表達(dá)載體pcDNA3.1（+）-mSLC,繼而研究這一真核表達(dá)載體在體內(nèi)外的表達(dá),以及表達(dá)產(chǎn)物的免疫趨化功能.為此,首先用RT-PCR的方法從C57BL/6小鼠胸腺組織克隆出SLC基因,并通過測(cè)序證明這一基因即為小鼠SLC基因Scya21b型;繼而構(gòu)建真核表達(dá)載體pcDNA3.1（+）-mSLC.In vitro,利用基因槍、脂質(zhì)體、電穿孔的方法,將pcDNA3.

2、1（+）-mSLC分別轉(zhuǎn)染至小鼠黑色素瘤細(xì)胞系B16F10、B16P15和小鼠紅白血病細(xì)胞系FBL-3,通過趨化小室趨化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)表明,轉(zhuǎn)染SLC基因的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清具有針對(duì)淋巴細(xì)胞的趨化功能.In vivo,利用基因槍的手段,對(duì)小鼠皮膚局部轉(zhuǎn)染SLC基因.通過皮膚病理檢查發(fā)現(xiàn),與轉(zhuǎn)染空載體相比,基因槍轟擊局部皮內(nèi)有明顯的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn).說明基因槍介導(dǎo)的SLC基因在體內(nèi)能夠表達(dá),并具有趨化活性.用G<,418>對(duì)轉(zhuǎn)染SLC基因的B16P1

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