空腸彎曲菌感染仔兔模型的建立及動物體內(nèi)誘導(dǎo)基因的篩選.pdf

1、商宇偉：空腸彎曲菌感染仔兔模型的建立及動物體內(nèi)誘導(dǎo)基兇的篩選三空腸彎曲茵感染仔兔模型的建立及動物體內(nèi)誘導(dǎo)基因的篩洗達(dá)研究生：商宇偉導(dǎo)師：黃金林教授焦新安教授中文摘要空腸彎曲菌(Campylobacterjejuni9)是一種重要的食源性人獸共患病原菌。人感染C，后主要引起細(xì)菌性胃腸炎(Bacterialgastroenteritis)和急性腹瀉，免疫力低下者會導(dǎo)致心內(nèi)膜炎、關(guān)節(jié)炎、骨髓炎、腦炎、敗血癥等全身性疾病。但迄今為止，對C，致病

2、性方面的研究尚不很清楚，其主要原因是缺乏合適的動物模型。本研究嘗試建立空腸彎曲菌感染仔兔腹瀉模型，探索該菌在仔兔模型體內(nèi)的動態(tài)分布、免疫應(yīng)答規(guī)律及可能的感染機(jī)制；并利用選擇性捕獲轉(zhuǎn)錄序列方法鑒定了空腸彎曲菌在感染兔體內(nèi)轉(zhuǎn)錄的基因，取得了滿意結(jié)果。一、空腸彎曲菌致仔兔腹瀉模型的建立本研究選用初生仔兔為實驗動物，因為相比嚙齒類動物，兔在系統(tǒng)發(fā)育和生理構(gòu)造上更相似于人類，初生動物還具有體內(nèi)清潔、體型小、方便飼養(yǎng)和易于管理等優(yōu)點。根據(jù)實驗所得最

3、佳建模條件，使用空腸彎曲菌NCTClll68為攻毒菌株，灌胃1109CFU劑量感染經(jīng)西咪替丁(50mg／kg)預(yù)處理的2日齡，體重為40x2g的仔兔。通過收集臨床癥狀、病理變化、病原分離和致病性資料評價模型建立情況。結(jié)果顯示空腸彎曲菌可人工感染仔兔并引起自限性的、水樣腹瀉癥狀；剖檢發(fā)現(xiàn)主要病變是小腸積液、腸壁出現(xiàn)出血點，盲腸、結(jié)腸腫大，腸腔內(nèi)充滿水樣內(nèi)容物；組織病理切片顯示盲腸黏膜出現(xiàn)壞死脫落，固有層小血管擴(kuò)張、充血。病原分離鑒定結(jié)果證

4、實各臟器感染菌株均為C，。劑量反應(yīng)實驗顯示腹瀉疾病的程度與攻毒劑量、腸道細(xì)菌定植量正相關(guān)，至少106CFU細(xì)菌可引起仔兔可觀察的腹瀉癥狀和各腸道的定植；至少104CFU細(xì)菌可引起盲腸和結(jié)腸的定植。不同來源空腸彎曲菌分離株對仔兔致病性存在明顯差異，說明該模型能夠有效評價。的毒力強(qiáng)弱。二、空腸彎曲菌仔兔體內(nèi)感染動態(tài)分析本研究在建立上述模型的基礎(chǔ)上，分別在攻毒后12，24，36，48和60hr剖檢仔兔，商宇偉：空腸彎曲菌感染仔兔模型的建立及動

5、物體內(nèi)誘導(dǎo)基兇的篩選三TheestablishmentofCampylobacterjejuniinfectionininfantrabbitmodelandinvestigationoftheivigenesinmodelanimalsMScandidate：YuweiShangAdvisors：ProfJinlinHuangProfXin’anJiaoAbstractIIlrllliiiIiiiI[1lIrllllIlllIIIII

6、rllJY2632992Campylobacterjejuni(cj)isanimportantzoonoticfoodbomepathogenItcancausehumanbacterialgastroenteritisandacutediarrheaifbeinginfectedImmunocompromisedpersonsCanleadtoendocarditis，arthritis，osteomyelitis，encephal

7、itis，sepsisandothersystemicdiseasesButSOfarahasnoappropriateanimalmodelsyetanditspathogenesisisnotfullyunderstoodThisstudyattemptedtoestablishinfantrabbitsmodelforqinfectioninduceddiarrheaandtostudythedynamicdistribution

8、ofbacteriainrabbitmodel，theregularpattemoftheimmuneresponseandpossibleinfectionmechanisms。UsingselectivecaptureoftranscribedsequencesmethodtoidentifycjgenesexpressedduringtheprocessofinfectionofinfantrabbitcecilmTheresul

9、tsofthisstudyachievedwouldbemeaningfulforin—depthstudyandcontrolofqinfection1、EstablishmentofinfantrabbitmodelforCjejuniinduceddiarrheaTheinfantrabbitswereselectedastheexperimentalanimalsbecausetheywerephylogeneticallymo

10、recloselyrelatedtoprimatesthanrodentswereandhadananatomyandphysiologythatmorecloselyresemblesthatofprimatesAlsothey’resmallinbodytype，convenienttofeed，andeasytomanageBasedontheoptimalmodelingconditionfromexperiments，orog

11、astricinoculationof109CFUCjejuniinto2dayold，402grabbitspretreatedwithcimetidine(50mg／kg)，andthenevaluatethemodelbycollectingclinicalsymptoms，pathologicalchanges，pathogenisolationandpathogenicityinformationTheresultsindic