空腸彎曲菌pcdna3.1()peb1a誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答初步探討

1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文空腸彎曲菌pcDNA3.1（-）-peb1A誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答初步探討姓名：王宜峰申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：孫萬邦;李官成20090501遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文 空腸彎曲菌p c D N A 3 ．1 ( 一) - p e b l A 誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答初步探討T o x i c - - T h e p r e l i m i n a r y r e s e a r c ho nt h ec e l

2、l u l a rr e s p o n s e i n d u c e db yt h e D N A v a c c i n e p c D N A 3 ．1 ( 一) - p e b l Aa g a i n s t C JA b s t r a c t ：O b j e c t i v e ：T o e x p l o r e t h e c e l l u l a r i m m u n er e s p o n s e m

3、e c h a n i s m a n dt h ep r o t e c t i o n o n t h e K u n m i n g m i c ea f t e r i m m u n i n g b y C a m p y l o b a c t e r j e j u n ip c D N A 3 ．1( - ) - p e b l A ．M e t h o d s ：( 1 ) I d e n t i f i c a t

4、i o na n dm a s s i v ep r e p a r a t i o no f r e c o m b i n a n tp l a s m i dp c D N A 3 ．1 ( 一) - p e b l A ．( 2 ) T og a t h e rt h es p l e e n c e l la n d t h eb l o o ds e r u mo f t h eK u n m i n gm i c e a

5、f t e ri m m u n i n gw i t hp c D N A 3 ．1 ( - ) - p e b l A ：O T h em o u s es p l e e n T l y m p h o c y t es u r f a c em o l e c u l e sC D 3 ，C D 4 ，C D 8 ，C D 2 5a n dC D 2 8 w e r et e s t e dw i t ht h em e t h

6、 o do fc e l l u l a re n z y m e —l i n k e di m m u n o s o r b e r ta s s a y ( E L I S A ) ．②T h el e v e l so f c y t o k i n e I L 一2 ，I L 一4 ，I L 一1 0 ，I F N f fa n d T G F —pi ns e r u mw e r et e s t e dw i t hE

7、 L I S A ．( 9 A t t a c k i n gt e s tw i t hC a m p y l o b a c t e r j ￡j u n i ：t h ee x p e r i m e n t a lg r o u p w e r ef i l l e dt h es t o m a c h a t t a c ko r a l l yl m ll x l0 yC a m p y l o b a c t e r j

8、 e j u r l i i n2 6d a y sa tt h ee n d o f t i m e sa f t e ri m m u n i z a t i o n ，a n d t h ea n i m a l s w e r em o n i t o r e d f o r t h e s i c k n e s s a n d d e a t h i n t h e l a t t e r w e e k ．C J b a

9、c t e r i ac u l t u r e sw e r e f i n i s h e df o r i n t e s t i n a le x c r e t i n g f l u i d a f t e rC a m p y l o b a c t e r j e j u n ia t t a c k i n g ．R e s u l t s ：( 1 ) T h eP C R p r o d u c to fr e o

10、 r g a n i z a t i o nm a t e r i a l p a r t i c l e p c D N A 3 ．1 ( 一) - p e b l AW a s t h es o l eb a n d i n g ，a n dt h es i z ew a s8 12 b p b yt h ea g a r o s eg e le l e c t r o p h o r e s i s ；t h ep u r i t

11、 yw a s1 ．9 2 9a n d t h ed e n s i t yW a s2 0 6 4 肛g ／m la f t e ru s i n gQ i a g e np l a s m i dG i g at h eK i tm a s s i v ee x t r a c t i o n ．( 2 ) T h ed e t e c t i o n r e s u l t i n t h el e v e l o fT l y

12、 m p h o c y t es u r f a c em o l e c u l e s s h o w e dt h a t ：①o n t h e d e t e c t i o n o f C D 3 ，t h e a d j u v a n tD N A g r o u p W a s h i g h e rt h a nt h eb a r eD N A g r o u p a n di t h a das i g n i