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1、近些年來(lái)天然防腐劑作為食品工業(yè)的熱點(diǎn)得到廣泛關(guān)注及研究。其中,酚類(lèi)物質(zhì)屬于植物提取物,天然無(wú)毒,具有多種生物活性和良好的抑菌性能,是一種具有巨大應(yīng)用潛力的天然防腐劑??漳c彎曲菌是一種食源性致病菌且已被全世界公認(rèn)為是細(xì)菌性腹瀉的主要致病菌。但由于其本身不耐高溫,只有飲水和乳制品等少量感染途徑,故對(duì)其進(jìn)行的研究以及研究成果并不多。本文通過(guò)對(duì)丁香酚和茶多酚這兩類(lèi)酚類(lèi)物質(zhì)對(duì)空腸彎曲桿菌的抑制效果的研究,若效果良好,則兩種酚類(lèi)物質(zhì)便可作為潛在的天
2、然食品防腐劑就預(yù)防空腸彎曲桿菌所引起的臨床疾病進(jìn)行更深一步的探究。
首先,本文通過(guò)菌體活性角度判定丁香酚和茶多酚的抑菌能力。從平皿打孔法鑒定丁香酚和茶多酚對(duì)空腸彎曲桿菌的抑菌效果的結(jié)果中,較大的抑菌圈很明顯的體現(xiàn)出二者都具有很好的抑菌效果。再將丁香酚用二倍稀釋法得到濃度分別為0.005;0.0025;0.00125和0.00062(mg/mL)的溶液,茶多酚用同樣的方法稀釋到濃度分別為80;60;40和20(mg/mL)。通過(guò)
3、瓊脂稀釋法測(cè)得了丁香酚和茶多酚對(duì)空腸彎曲桿菌的最低抑菌濃度分別為0.00125mg/mL和40mg/mL。在不同培養(yǎng)環(huán)境條件下,丁香酚和茶多酚對(duì)空腸彎曲桿菌的抑制效果研究結(jié)果也顯示,環(huán)境的改變對(duì)空腸彎曲桿菌的影響是較大的,尤其是溫度改變的影響,而鹽濃度與pH的兩種條件對(duì)酚類(lèi)物質(zhì)的抑菌效果可產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng),鹽濃度在1.5%-2%之間或是偏堿環(huán)境下能有效提高兩種酚類(lèi)物質(zhì)的抑菌效果。
其次,從菌體的形態(tài)特征出發(fā),直觀的觀察菌體在受抑菌
4、物質(zhì)作用后形態(tài)的變化。結(jié)果均發(fā)現(xiàn)菌體表面有破損,且部分菌體細(xì)胞破裂并有內(nèi)容物溢出。
然后,按照抑菌機(jī)理中現(xiàn)已明確認(rèn)定的抑菌物質(zhì)會(huì)對(duì)菌體的細(xì)胞膜產(chǎn)生破壞性作用的實(shí)驗(yàn)結(jié)論出發(fā),通過(guò)蛋白滲透實(shí)驗(yàn),激光掃描共聚焦顯微鏡(LSCM)觀察分析和拉曼光譜分析分別進(jìn)行了驗(yàn)證。熒光強(qiáng)度的變化反應(yīng)出兩種酚類(lèi)物質(zhì)濃度越高,對(duì)菌膜的損壞越大。而LSCM觀察得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果更是佐證了菌體細(xì)胞確實(shí)受損,并能導(dǎo)致大量菌體死亡或生處VBNC狀態(tài)。
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