大鼠液壓腦損傷導(dǎo)致皮層神經(jīng)細胞的早期凋亡和Casepase-10基因表達差異研究.pdf

1、嚴重顱腦創(chuàng)傷由于其高死亡率和高病殘率一直是神經(jīng)外科研究最為關(guān)注的課題之一。迄今為止在嚴重顱腦創(chuàng)傷的治療上尚沒有取得突破性進展，主要在于對創(chuàng)傷性腦損傷的機理尚不清楚。本實驗以大鼠液壓腦損傷為模型，利用Annexin V-FITC標記后的流式細胞儀檢測和電子顯微鏡進行形態(tài)觀察，進一步探討大鼠腦損傷后神經(jīng)細胞的早期凋亡及凋亡的時程變化。同時采用實時定量RT-PCR檢測技術(shù)，對Caspase-10基因在S-D大鼠液壓顱腦損傷前后表達差異的動態(tài)過

2、程進行定量觀察。探討Caspase-10基因在S-D大鼠液壓顱腦損傷前后表達差異，為進一步認識caspase-10 在顱腦損傷后細胞凋亡中的作用機制積累資料。 第一部分 大鼠液壓腦損傷導(dǎo)致皮層神經(jīng)細胞的早期凋亡 目的：觀察大鼠腦損傷后神經(jīng)細胞的早期凋亡及其動態(tài)變化。 方法：在制作大鼠左項葉液壓腦損傷模型的基礎(chǔ)上，采用流式細胞儀和電子顯微鏡，對大鼠液壓腦損傷后神經(jīng)細胞凋亡的動態(tài)過程進行觀察。 結(jié)果：流式細胞

3、儀檢測結(jié)果顯示大鼠液壓腦損傷后6小時左側(cè)頂葉皮層神經(jīng)細胞即可出現(xiàn)早期凋亡現(xiàn)象。傷后6小時神經(jīng)細胞的早期凋亡率為21.97％(p<0.01)，傷后24小時達高峰，為65.90％(p<0.01)，傷后48小時與傷后24小時比較無顯著性差異(p>0.05)。電鏡觀察發(fā)現(xiàn)傷后24小時可出現(xiàn)早期凋亡。 結(jié)論：大鼠液壓腦損傷后6小時即可出現(xiàn)神經(jīng)細胞的早期凋亡，較以往報道的傷后神經(jīng)細胞凋亡出現(xiàn)的時間更早。 第二部分 Casepase

4、-10基因在大鼠液壓顱腦損傷前后表達差異分析 目的：探討Caspase-10基因在S-D大鼠液壓顱腦損傷前后表達的差異。 方法：在制作大鼠左項葉液壓腦損傷模型的基礎(chǔ)上，采用實時定量RT-PCR(quantitatiVe real-time PCR，QT-RT-PCR)檢測技術(shù)，對Caspase-10基因在S-D大鼠液壓顱腦損傷前后表達差異的動態(tài)過程進行定量觀察。 結(jié)果：實時定量RT-PCR檢測結(jié)果顯示液壓腦損傷導(dǎo)

5、致S-D大鼠皮層神經(jīng)細胞caspase-10基因表達上調(diào)，發(fā)生于傷后6小時(2969.53±1217.08)，持續(xù)至傷后48小時(494.11±261.96)下降為正常；而損傷對側(cè)無影響。 結(jié)論：首次定量檢測發(fā)現(xiàn)大鼠液壓腦損傷后6小時即可出現(xiàn)皮層神經(jīng)細胞的caspase-10基因表達上調(diào)，較以往報道的神經(jīng)細胞Caspase-3基因的傷后48小時上調(diào)(0.49±0.22)出現(xiàn)的時間更早，較Caspase-8基因于傷后6小時(0.1