犬Ⅲ型干擾素的功能特點及B型流感病毒NEP蛋白出核功能研究.pdf

1、在本研究中，首次對犬Ⅲ型干擾素的功能進行了詳細的研究?；诤怂嵝蛄械南到y(tǒng)進化分析表明，該犬Ⅲ型干擾素與豬IFN-λ1，蝙蝠IFN-λ1和人IFN-λ1自然的聚為一支，表明該犬Ⅲ型干擾素為IFN-λ1。將該IFN-λ1于大腸桿菌中進行了表達，純化，并對純化后的蛋白進行了功能研究。結果表明，該IFN-λ1在同種和異種細胞上均具有一定的抗病毒活性，包括VSV病毒、犬細小病毒和H1N1流感病毒等。研究還發(fā)現(xiàn)犬IFN-λ1在CMT腫瘤細胞和MDC

2、K細胞上均具有抗增殖活性，且在CMT腫瘤細胞上的抗增殖活性更強。此外，犬IFN-λ1可以激活JAK-STAT信號傳導系統(tǒng)。為了驗證該犬IFN-λ1是否能誘導干擾素誘導基因的表達，我們還用實時熒光定量PCR的方法檢測了犬IFN-λ1刺激MDCK細胞后的ISG15，Mx1和2'5'-OAS表達水平，結果表明，該三種干擾素誘導基因均被顯著上調。我們還用同樣的方法檢測了VSV和流感病毒感染后的MDCK細胞中的IFN-λ1的mRNA水平，結果顯示

3、，與對照相比，IFN-λ1的mRNA水平也明顯被上調。最后，本研究還通過ELISA的方法進行了犬IFN-λ1與其受體胞外域（IFNλR1-EC）的結合檢測，結果顯示，犬IFN-λ1能很好的與IFNλR1-EC進行結合。
　　流感病毒的核輸出蛋白(NEP蛋白)是病毒粒子中的結構蛋白，由病毒的第八個基因片段編碼產(chǎn)生，在病毒的基因組復制與轉錄，病毒vRNP復合物的細胞核輸出過程、病毒粒子的組裝、出芽等多個環(huán)節(jié)發(fā)揮著重要作用。目前對B型流