Cathepsin D在星形細胞瘤中的表達及其與腫瘤微血管生成的相關性研究.pdf

1、研究背景:星形細胞瘤是起源于中樞神經系統(tǒng)白質和灰質的星形細胞，是神經系統(tǒng)最常見的腫瘤，約占全部顱內腫瘤的20％，占膠質瘤的70％以上，其浸潤性生長的特點是其復發(fā)的根源，腫瘤生長的邊界不清致使手術全切除率低、復發(fā)率高，多數患者術后即使輔以放療、化療等聯合治療，預后仍然不佳，是目前神經外科治療的難題。最重要的原因是對星形細胞瘤侵潤及發(fā)展的機制尚不十分清楚，近年的研究表明其機制與腫瘤細胞外基質的降解密切相關；此外有實驗研究表明實體腫瘤的生長依

2、賴新生血管的形成，腫瘤內新生血管形成與腫瘤增殖過程中產生和釋放的腫瘤血管形成因子有關，并且分化差的腫瘤細胞產生的腫瘤血管形成因子要多于高分化腫瘤。當克隆性生長的腫瘤長大到幾個毫米大小時，其進一步生長則必須有新的血管形成。如果腫瘤不能血管化，其體積不會超過1-2mm3。 組織蛋白酶D(CathepsinD)是一種酸性溶酶體天冬氨酸蛋白酶.以低濃度存在幾乎任何細胞中，分子量大約為42000，分布廣泛。實驗研究提示CathepsinD

3、的表達在乳腺腫瘤、胃腸道腫瘤、甲狀腺腫瘤的侵襲轉移中起著重要的作用，其表達水平對腫瘤患者的預后也有重要影響。F-ⅧRag是一種糖蛋白，存在于血管內皮細胞weibel-paladal小體上，是具有特異性的內皮細胞標記物，是抗干擾較強的血管標志物。目前國外對CathepsinD與膠質瘤侵襲生長的關系有所研究，但是有關CathepsinD在星型細胞瘤中的表達以及其表達程度對腫瘤血管生成的影響和對患者生存預后影響，國內外尚無有關報道。因此，本試

4、驗采用免疫組化技術檢測70例手術切除的星形細胞瘤標本和10例正常腦組織標本，目的在與探討CathepsinD的表達及其程度對腫瘤微血管生成的影響，結合臨床隨訪資料探究其對患者生存的影響。 材料和方法本實驗分兩組：腫瘤組和正常對照組。腫瘤組選用廣州醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院神經外科2000年1月至2004年12月期間手術切除的腦星形細胞瘤標本70例，男性45例，女性25例，年齡11歲-69歲，平均年齡39.53歲，幕上58例，幕下12例，

5、腫瘤最小1cm×1cm×2cm最大者4cm×6cm×6cm。按照WHO分類標準，星形細胞瘤Ⅰ級4例(毛細胞性星形細胞瘤)，星形細胞瘤Ⅱ級28例(彌漫型星形細胞瘤)，星形細胞瘤Ⅲ級26例(間變型星形細胞瘤)，星形細胞瘤Ⅳ級18例(膠質母細胞瘤)。正常對照組10例標本來自腦外傷內減壓手術和高血壓腦出血手術中所取的正常腦組織。 3石蠟切片經過脫蠟、水化、微波修復抗原等步驟后，分別使用抗CathepsinD多克隆抗體和抗F-ⅧRag抗體

6、，采用免疫組化S-P法檢測腫瘤組織中CathepsinD的表達水平，F-ⅧRag標記腫瘤中的MVD。陽性為血管內皮細胞染成棕褐色，血管密度計量方法：采用Weidner血管計數法，在多功能顯微鏡200倍視野下，隨機計數20個視野，取其平均值，單位：個/mm2 實驗結果1.正常對照組CathepsinD的表達為陰性。 2.星形細胞瘤組中CathepsinD表達率為66％(46/70)，與正常對照組相比有統(tǒng)計學意義。

7、3.CathepsinD在腫瘤組織中的陽性表達率與星形細胞瘤的病理分級密切相關：低級別星形細胞瘤中的表達率(46％)，陽性細胞平均百分率為10.52±4.78％，顯著低于高級別星形細胞瘤中表達率(74％)，陽性細胞平均百分率分別為39.76％±8.97％，56.28％±10.35％，各組對比有顯著差異(P＜0.01)。 4.星形細胞瘤組MVD35.21±12.07，正常腦組織組中平均微血管密10.40±3.17，兩組相比有顯著差

8、異(P＜0.01)，MVD值與星形細胞瘤CathepsinD表達呈正相關。 5.復發(fā)組及死亡組中星形細胞瘤CathepsinD陽性表達率要高于未復發(fā)組和未死亡組，差異具有顯著性，高陽性表達率是患者預后的高風險因素。 4結論1.星形細胞瘤中CathepsinD的表達可作為判斷星形細胞瘤惡性程度的重要生物學指標。 2.CathepsinD的高表達與星形細胞瘤的血管生成密切相關。 3.CathepsinD是影響