新城疫病毒抗小細(xì)胞肺癌的研究.pdf

1、目的:通過醛化紅細(xì)胞法收集尿囊液中病毒顆粒，PBS稀釋至1×107PFU/ml作為NDV注射液，實驗組每只裸鼠瘤內(nèi)注射0.1ml。按規(guī)定時間測量腫瘤體積大小及裸鼠體重，繪制腫瘤生長曲線。NDV注射6周后處死裸鼠，秤量瘤塊和脾臟，計算抑瘤率和脾臟指數(shù)，進(jìn)行毒性評價，腫瘤組織用10％的福爾馬林溶液固定，行HE染色，評價移植瘤細(xì)胞在光學(xué)顯微鏡下的病理變化。通過S-P免疫組化檢測移植瘤中Bax和Bcl-2蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果:

2、 1.實驗中14株NDV對人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株NCI-H446有較強(qiáng)的殺傷作用，同等條件下對人胚肺成纖維細(xì)胞株HFL-1影響較小(P＜0.01)。 2.本實驗中除NDV D713株外，13株NDV對腫瘤細(xì)胞的殺傷效應(yīng)與病毒作用時間呈正相關(guān)。 3.NDV D713株作用48小時后對腫瘤細(xì)胞的殺傷效應(yīng)隨病毒濃度的降低而增強(qiáng)。 4.候選NDV毒株D417株和D922株對肺癌細(xì)胞有較強(qiáng)殺傷性，感染肺癌細(xì)胞48小時后可導(dǎo)致9

3、0％左右的細(xì)胞死亡，但是對正常肺部細(xì)胞影響較小，48小時后殺傷率僅20％左右。 5.NDV D417株和NDV D922株能夠在肺癌細(xì)胞中復(fù)制增殖，其HA效價的增長速度為正常肺部細(xì)胞中生長的64～128倍。 6.NDV D417株與NDV D922株體外抗肺癌作用相比，在高濃度病毒作用情況下(106～107 PFU/ml)差別無統(tǒng)計學(xué)意義，低濃度病毒作用情況下(104～105PFU/ml)NDV D417株抗肺癌作用較強(qiáng)

4、。 7.經(jīng)過肺癌細(xì)胞中選擇性擴(kuò)增傳代后候選NDV毒株對肺癌細(xì)胞的殺傷效應(yīng)有部分提高，對肺部正常細(xì)胞的殺傷效應(yīng)無顯著性變化。 8、裸鼠皮下接種肺癌細(xì)胞10天后明顯成瘤，成功建立了人小細(xì)胞肺癌裸鼠移植瘤模型，成瘤率100％。 9、NDV 7793株和陽性對照藥順鉑注射液均能抑制移植瘤生長，抑制率分別為34.1％和50.7％。 10、NDV 7793株治療對裸鼠無明顯毒副作用，而順鉑給藥治療陽性對照組對裸鼠存在明顯毒副

5、作用。 11、病理學(xué)檢查結(jié)果顯示與陰性對照組相比，NDV組腫瘤細(xì)胞形態(tài)模糊，細(xì)胞壞死/凋亡范圍較大。 12、免疫組化檢測顯示NDV組腫瘤細(xì)胞Bax蛋白的表達(dá)程度高于陰性對照組，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。NDV組Bc1-2蛋白的表達(dá)與陰性對照組相比無顯著性差異。 結(jié)論: 1.實驗所選14株NDV具有選擇性在人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中復(fù)制增殖和殺傷癌細(xì)胞的作用，具備抗腫瘤生物治療應(yīng)用潛能；其中篩選出的D41