冠心病患者尿激酶型纖溶酶原激活物受體（uPAR）與黏附分子CD11b-CD18表達(dá)水平及對(duì)單核細(xì)胞黏附功能影響研究.pdf

1、背景：纖溶系統(tǒng)不僅促使纖維蛋白的溶解，而且參與了很多病理、生理過(guò)程，例如細(xì)胞遷移、組織重塑。纖溶系統(tǒng)在炎癥、新生血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中也起到重要作用。尿激酶型纖溶酶原激活物受體(uPAR)是纖溶系統(tǒng)中較為重要的成分。uPAR可以與細(xì)胞胞外及細(xì)胞膜上一些分子結(jié)合，例如尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)、玻璃體粘連蛋白(VN)、整合素等。uPAR除了可以激活細(xì)胞周?chē)鞍姿膺€參與細(xì)胞黏附、細(xì)胞增殖和趨化等過(guò)程，這些生物學(xué)功能貫穿于動(dòng)脈粥

2、樣硬化發(fā)生演變的過(guò)程中。越來(lái)越多證據(jù)表明，局部和全身炎癥在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展中起著重要作用。白細(xì)胞黏附到血管內(nèi)皮細(xì)胞是動(dòng)脈粥樣硬化最早期的病理變化，白細(xì)胞跨內(nèi)皮遷移至血管壁間隙是組織損傷和炎癥反應(yīng)的必要步驟，白細(xì)胞與血管內(nèi)皮的黏附是此過(guò)程的中最重要的一環(huán)。CD11b/CD18是整合素家族中一員，它作為uPAR配體可與uPAR形成復(fù)合體結(jié)構(gòu)介導(dǎo)細(xì)胞黏附過(guò)程。白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間的黏附是通過(guò)CDllb/CDl8與其另一配體-內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的細(xì)胞

3、間粘附分子-1(ICAM-1，CD54)相互作用而介導(dǎo)完成的。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸糖原水解酶(NADG)、磷脂酰肌醇磷脂酶C(PI-PLC)可以破壞uPAR與CD11b/CD18形成的復(fù)合體結(jié)構(gòu)。 目的：研究不同臨床類(lèi)型冠心病患者外周血單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞上uPAR、CD11b/CD18的表達(dá)水平及單核細(xì)胞黏附功能，探討氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)和高濃度葡萄糖對(duì)單核uPAR、CD11b/CD18的表達(dá)和黏附功能的影響并比較

4、抗uPAR抗體、抗CD11b抗體、NADG、PI-PLC、抗ICAM-1抗體對(duì)單核細(xì)胞黏附功能的抑制作用。 方法：研究對(duì)象包括在協(xié)和醫(yī)院門(mén)急診及住院的急性心?；颊?6例，陳舊心梗患者患者23例，健康志愿者20例，用流式細(xì)胞儀測(cè)量外周血單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞上uPAR、CD11b/CD18表達(dá)的熒光強(qiáng)度和比例。采用密度梯度離心法和粘附法分離純化冠心病患者外周血單核細(xì)胞，加入oxLDL和高濃度葡萄糖刺激體外培養(yǎng)的單核細(xì)胞，用ELISA

5、法檢測(cè)單核細(xì)胞產(chǎn)生的uPAR及CD11b/CD18抗原。并將第二部分用oxLDL和高濃度葡萄糖體外刺激培養(yǎng)的單核細(xì)胞與臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞黏附，比較抗uPAR抗體、抗CD11b抗體、NADG、PI-PLC、抗：ICAM-1抗體等對(duì)黏附功能的抑制作用。 結(jié)果：急性心?；颊咄庵苎獑魏?、中性粒細(xì)胞上uPAR、CD11b/CD18的表達(dá)水平均較陳舊心?；颊呒罢Ｈ私M顯著性升高(p<0.05)。陳舊心?；颊吲c正常人外周血單核、中性粒細(xì)胞上uPA

6、R.、CD11b/CD18的表達(dá)水平之間沒(méi)有顯著性差異。在體外實(shí)驗(yàn)中，oxLDL與高濃度的葡萄糖可以顯著上調(diào)正常人及陳舊心?；颊邌魏思?xì)胞上uPAR、CD11b/CD18的表達(dá)(p<0.05)，并增強(qiáng)單核細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞黏附能力_。急性心?；颊咄庵苎獑魏思?xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞黏附能力均較陳舊心?；颊呒罢Ｈ私M顯著性增強(qiáng)(p<0.05)。陳舊心?；颊吲c正常人外周血單核細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞黏附能力之間沒(méi)有顯著性差異。抗uPAR抗體、抗CD11b抗體的應(yīng)用可有

7、效降低單核細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的黏附能力。NADG、PI-PLC、抗ICAM-1抗體對(duì)單核細(xì)胞的黏附功能明顯抑制，各組不同患者、不同刺激物培養(yǎng)的單核細(xì)胞黏附率下降到幾乎相近的水平。 結(jié)論：本研究證實(shí)急性心?；颊邌魏思?xì)胞、中性粒細(xì)胞上uPAR、CD11b/CD18表達(dá)水平較陳舊心?；颊呒罢Ｈ孙@著升高，單核細(xì)胞黏附功能顯著增強(qiáng)。陳舊心?；颊吲c正常人在單核細(xì)胞uPAR、CD11b/CD18表達(dá)及單核細(xì)胞黏附功能上均沒(méi)有顯著差別。高糖、高脂