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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:建立單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)大鼠模型,探索UUO不同時(shí)間點(diǎn)尿激酶型纖溶酶原激活物(u-PA)表達(dá)與腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(EMT)的關(guān)系,分析u-PA對(duì)EMT的影響。
方法:普通級(jí)SD雄性大鼠64只,3-4周齡,體重100-120g。隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham)和UUO組,每組各32只。各組大鼠在左側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)后3d,7d,14d,28d各處死8只實(shí)驗(yàn)大鼠,取梗阻一側(cè)腎臟組織進(jìn)行病理學(xué)分析,觀察各組大鼠在UUO后不同時(shí)間
2、點(diǎn)腎小管間質(zhì)損傷、腎間質(zhì)纖維化程度及腎小管基底膜(TBM)破壞程度,并采用免疫組織化學(xué)染色方法觀察u-PA在各組的表達(dá)及鈣粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、纖維連結(jié)蛋白(FN)的動(dòng)態(tài)變化。分別對(duì)Sham組和UUO組各時(shí)間點(diǎn)相關(guān)觀察指標(biāo)進(jìn)行組間、組內(nèi)比較,并對(duì)UUO組u-PA與E-cadherin陽(yáng)性評(píng)分、TBM斷裂的腎小管百分比進(jìn)行相關(guān)性分析。數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。
結(jié)果:與
3、Sham組相比,UUO組腎小管間質(zhì)損傷程度、腎間質(zhì)纖維化程度及TBM破壞程度均明顯加重(P﹤0.05)。隨著梗阻時(shí)間的延長(zhǎng),腎小管間質(zhì)中α-SMA、FN表達(dá)逐漸增加,E-cadherin表達(dá)逐漸減少,UUO組術(shù)后3d可見(jiàn)u-PA蛋白在腎間質(zhì)表達(dá)呈陽(yáng)性,術(shù)后7d達(dá)峰值,14d至28d則呈下降趨勢(shì)。UUO早期(梗阻7d前)u-PA陽(yáng)性染色評(píng)分與 E-cadherin陽(yáng)性染色評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.993,P﹤0.05);UUO中晚期(梗阻7
4、d之后)u-PA陽(yáng)性染色評(píng)分與E-cadherin陽(yáng)性染色評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.955,P﹤0.05)。UUO組u-PA表達(dá)與TBM斷裂的腎小管百分比的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),兩者呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.556,P﹤0.001),這反過(guò)來(lái)提示我們,UUO組u-PA表達(dá)與TBM完整性呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。
結(jié)論:①UUO大鼠模型是研究EMT的較理想動(dòng)物模型。②腎間質(zhì)u-PA蛋白表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化影響TBM的完整性和腎臟ECM的堆積,參與EMT,影響腎
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