利用大腸桿菌發(fā)酵制備siRNA及其在抑制乙型肝炎病毒復(fù)制中的應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、RNA干擾(RNAinterference，RNAi)是指雙鏈RNA特異性地誘發(fā)與其序列同源的mRNA分子被降解，從而抑制基因表達(dá)的現(xiàn)象，是一種特殊的轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)沉默(posttranscriptionalgenesilence，PTGS)現(xiàn)象。其高效專(zhuān)一地抑制特定基因表達(dá)沉默的特點(diǎn)使RNA干擾技術(shù)被廣泛應(yīng)用于基因功能研究。近年來(lái)在細(xì)胞和動(dòng)物體系中進(jìn)行的抗腫瘤和抗病毒等應(yīng)用研究表明，RNA干擾技術(shù)在疾病治療領(lǐng)域同樣具有誘人的應(yīng)用前景。

2、然而要將該技術(shù)成功應(yīng)用于臨床實(shí)踐，仍有幾個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題需要解決，其中之一是如何以較低的成本大規(guī)模制備siRNA。本論文的工作針對(duì)這一關(guān)鍵問(wèn)題提出了一種新的siRNA制備方法。并成功利用以該方法制備的siRNA抑制了乙型肝炎病毒(HBV)在人肝癌細(xì)胞以及小鼠肝臟內(nèi)的復(fù)制。　　第一章中的工作建立了利用大腸桿菌表達(dá)并純化目的基因雙鏈RNA的方法。　　第二章中的工作包括制備大腸桿菌Ⅲ型RNA水解酶并優(yōu)化其水解雙鏈RNA的條件以及建立用離子交換層

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