P65、β-catenin表達在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用研究.pdf

1、目的：乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤，居全球女性惡性腫瘤發(fā)病率的首位，在我國的發(fā)病率呈穩(wěn)定上升的趨勢。乳腺癌的75％表現(xiàn)為浸潤性導管癌，目前按病理學進程大致將其發(fā)生劃分為正常乳腺上皮→增生→不典型增生→原位癌→浸潤性癌→轉(zhuǎn)移性癌等幾個階段，但其過程中確切分子機制至今仍不詳。隨著分子生物學技術(shù)和蛋白與基因組學的進步，乳腺癌相關(guān)新基因和細胞信號轉(zhuǎn)導通路的逐步闡明，探討其參與乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用和意義將是重要課題。迄今，分析NF-κB信號途徑的

2、關(guān)鍵蛋白P65和Wnt信號途徑的中心成員β-catenin是乳腺癌研究領(lǐng)域受關(guān)注的熱點。 NF-κB已知有5個家族成員：P50、P52、P65(RelA)、C-Rel和RelB。其中分布廣泛的為P50/P65二聚體，兩個亞單位都能與靶基因的啟動子DNA結(jié)合，但只有P65末端含有反式激活結(jié)構(gòu)域，具有激活基因轉(zhuǎn)錄的作用。因而，P65是NF-κB信號通路中的一個關(guān)鍵蛋白。當細胞受到內(nèi)毒素、過氧化物、細胞毒素、紫外線、離子射線等的細胞外

3、信號刺激時，P65被活化并上調(diào)與腫瘤發(fā)生及進展階段相關(guān)的癌基因，影響細胞增殖和凋亡，從而導致腫瘤的發(fā)生。 β-catenin是一種細胞骨架蛋白，其中心區(qū)域含有12個不完全重復序列，在與鈣粘蛋白、APC、T細胞因子(T-cellfactor,TCF)等的結(jié)合過程中有重要作用。胞質(zhì)內(nèi)β-catenin的穩(wěn)定是經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路的核心因素。當β-catenin處于低水平時，Wnt通路關(guān)閉，反之，Wnt通路開啟。β-

4、catenin進入細胞核和TCF轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，誘導腫瘤相關(guān)靶基因的表達，促進腫瘤細胞的異常增殖和浸潤、轉(zhuǎn)移。β-catenin除了是Wnt信號通路的中心成員，也參與細胞間黏附的調(diào)節(jié)，可能對腫瘤的發(fā)展起到一定的作用。 研究表明，P65和β-catenin在人乳腺癌組織中均有高表達，但它們在乳腺癌發(fā)生發(fā)展序列中的作用時點、機制及兩者的相關(guān)性仍不詳。本課題選擇乳腺囊性增生病、導管內(nèi)乳頭狀瘤→導管上皮異型增生→導管內(nèi)癌(或伴早期浸潤)→

5、浸潤性導管癌作為研究路線，采用免疫組化的方法(Envision+法)對2000年6月-2005年6月收治的不同病理階段的乳腺組織中P65、β-catenin的表達狀況進行檢測，探討兩者在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用、相關(guān)性及其與相關(guān)臨床病理參數(shù)的關(guān)系，并為乳腺癌的防治提供依據(jù)。 材料與方法：采用免疫組化的方法(Envision+法)研究2000年6月-2005年6月經(jīng)手術(shù)病理證實的27例乳腺囊性增生病、25例導管內(nèi)乳頭狀瘤、26例導管

6、上皮異型增生、29例導管內(nèi)癌(或伴早期浸潤)、58例浸潤性導管癌組織中P65、β-catenin的表達狀況、相關(guān)性和與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。采用SPSS10.0forwindows軟件進行統(tǒng)計分析，率的比較采用X2檢驗，相關(guān)性分析采用Spearman法。 結(jié)果：1、P65在乳腺導管內(nèi)乳頭狀瘤、囊性增生病、囊性增生病伴異型、導管內(nèi)癌(或伴早期浸潤)和浸潤性導管癌中的陽性表達率分別為8.0％、11.1％、42.3％、31.0％和48.

7、3％。各組間表達的差異具有統(tǒng)計學意義(X2=12.561，P＜0.05)。在囊性增生病伴異型、導管內(nèi)癌(或伴早期浸潤)和浸潤性導管癌中的陽性表達率明顯高于囊性增生病和導管內(nèi)乳頭狀瘤(X2=6.632，P＜0.05)。 2、P65在乳腺浸潤性導管癌中的表達與組織學分級(X12=4.199，X22=4.25，P＜0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(X2=5.625，P＜0.05)和TNM分期均有顯著的相關(guān)性(X2=5.871，P＜0.05)；與

8、腫瘤直徑的大小、年齡無明顯相關(guān)性。在乳腺導管內(nèi)癌，有無早期浸潤P65表達的差異無統(tǒng)計學意義((X2=3.155，P＞0.05) 3、β-catenin在乳腺導管內(nèi)乳頭狀瘤、囊性增生病、囊性增生病伴異型、導管內(nèi)癌(或伴早期浸潤)和浸潤性導管癌中的陽性表達率分別為4.0％、3.7％、23.1％、72.4％和79.3％。各組間表達的差異具有統(tǒng)計學意義(X2=76.877，P＜0.01)。但良性疾病囊性增生病和導管內(nèi)乳頭狀瘤之間(X2=

9、0.003，P＞0.05)及導管內(nèi)癌(或伴早期浸潤)與浸潤性導管癌之間(X2=0.519，P＞0.05)的差異無統(tǒng)計學意義。 4、β-catenin的單純膜表達與腫瘤直徑的大小、TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況顯著相關(guān)。直徑小的表達率更高(X2=8.526，P＜0.01)。Ⅰ、Ⅱ期的表達率高于Ⅲ期(X2=23.684，P＜0.01)。淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移的表達率明顯高于有轉(zhuǎn)移組(X2=12.737，P＜0.01)。膜表達與腫瘤的組織學分級(X

10、2=2.503，P＞0.05)、患者年齡均無明顯的相關(guān)性(X2-2.632，P＞0.05)。β-catenin的膜漿共表達與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性(X2=6.67，P＜0.05)，與臨床分期、組織學分級等無明顯相關(guān)(P＞0.05)。β-catenin膜漿表達的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高于膜表達組(X2=5.476，P＜0.05)。 5、P65和β-catenin同時表達時，TNMⅢ期(X2=5.280，P＜0.05)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率(X

11、2=7.816，P＜0.01)和組織學Ⅲ級(X2=6.348，P＜0.05)的比例均明顯高于非同時表達組，而Ⅰ、Ⅱ期(X2=5.280，P＜0.01)和Ⅰ級的比例(X2=8.114，P＜0.01)明顯減低，但對年齡(X2=2.632，P＞0.05)和腫瘤直徑的大小(X2=1.115，P＞0.05)無明顯影響。P65和β-catenin的表達在乳腺導管內(nèi)乳頭狀瘤和囊性增生病兩者無明顯相關(guān)性(r=0.180，P＞0.05)。在囊性增生病伴異

12、型(r=0.392，P＜0.05)和乳腺導管癌(r=0.429，P＜0.01)兩者有明顯的正相關(guān)。 結(jié)論：1、P65和β-catenin在囊性增生病伴異型、導管內(nèi)癌(或伴早期浸潤)和浸潤性導管癌中的陽性表達率明顯高于囊性增生病和導管內(nèi)乳頭狀瘤，它的作用可能始于癌變的早期并持續(xù)存在。 2、P65在乳腺癌中的表達與組織學分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期均有顯著的正相關(guān)性，提示P65與浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)；β-catenin的膜漿表達與

13、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，提示β-catenin蛐膜漿表達的乳腺癌易發(fā)生轉(zhuǎn)移，兩者可能是預后不良的因素。β-eatenin的膜表達與腫瘤直徑的大小、TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況呈負相關(guān)，可能提示預后較好。 3、P65和β-catenin表達在乳腺導管內(nèi)乳頭狀瘤和囊性增生病中兩者無明顯相關(guān)性，在囊性增生病伴異型和乳腺導管癌兩者有明顯的正相關(guān)。當P65和β-eatenin同時表達時，TNMⅢ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率和組織學Ⅲ級的比例均明顯高于非同時