兔出血癥不同佐劑滅活苗的研制.pdf

1、兔出血癥俗稱兔瘟，是危害養(yǎng)兔業(yè)的一種烈性、病毒性傳染病。臨床病癥以發(fā)病急、潛伏期短、傳播快、死亡迅速為特征，主要侵害青年兔，死亡率可高達(dá)100％，目前對該病的防制主要采用兔出血癥組織滅活苗進(jìn)行預(yù)防接種。在疫苗生產(chǎn)中，免疫佐劑起著重要的作用，當(dāng)前科技工作者主要研發(fā)有油佐劑、鋁佐劑等疫苗。在臨床中，沒加佐劑的組織滅活苗產(chǎn)生抗體快，但是體內(nèi)抗體峰值和抗體持續(xù)時(shí)間短，加有佐劑的滅活疫苗，體內(nèi)抗體峰值和持續(xù)時(shí)間則相對較長。所以研制新型佐劑疫苗，既

2、能使抗體迅速產(chǎn)生、又能使抗體持續(xù)期延長是當(dāng)前兔出血癥疫苗的一個(gè)重要方向。 本研究主要是將傳統(tǒng)滅活苗工藝進(jìn)行改進(jìn)，同時(shí)加入一些新型佐劑，目的是要提高兔出血癥疫苗的免疫效果。將制作完備的組織滅活苗、油佐劑疫苗、蜂膠佐劑疫苗、鋁膠佐劑疫苗、細(xì)菌CpG DNA佐劑疫苗、轉(zhuǎn)移因子疫苗、復(fù)合佐劑疫苗1、復(fù)合佐劑疫苗2進(jìn)行了無菌、粘稠度、穩(wěn)定性、劑型、安全性及免疫力產(chǎn)生時(shí)間、免疫效力和免疫持續(xù)期等檢測。其結(jié)果是：8種疫苗培養(yǎng)后，均未見細(xì)菌生長

3、；精制后的組織滅活苗，顏色呈淺黃色，半透明狀，瓶底有極少量沉淀；油佐劑疫苗和復(fù)合免疫佐劑疫苗2粘稠度檢驗(yàn)為稀薄乳劑，未出現(xiàn)油水分層現(xiàn)象，是油包水型；蜂膠佐劑疫苗靜置后性狀穩(wěn)定，未見分層現(xiàn)象；鋁膠佐劑疫苗，靜置后疫苗呈淺黃色，瓶底有少量沉淀；細(xì)菌CpG DNA佐劑疫苗、轉(zhuǎn)移因子疫苗、復(fù)合佐劑疫苗1靜置后疫苗呈淺黃色，瓶底有少量沉淀；疫苗安全性檢驗(yàn)中，注射8種疫苗后實(shí)驗(yàn)兔未見有死亡，其中油佐劑疫苗、復(fù)合佐劑疫苗2的注射部位有組織增生現(xiàn)象，蜂

4、膠佐劑疫苗、鋁膠佐劑疫苗、復(fù)合佐劑疫苗1的注射部位的皮下有包囊，組織滅活苗、細(xì)菌CpG DNA佐劑疫苗、轉(zhuǎn)移因子疫苗的注射部位沒有明顯的變化；以0．5ml、1 ml、2 ml注射7d檢測，這8種疫苗均已開始產(chǎn)生抗體，1ml和2ml劑量優(yōu)于0．5ml劑量的抗體滴度，而1ml和2ml劑量的抗體滴度相，故優(yōu)選1ml作為注射劑量。這1ml劑量中，組織滅活苗（自制/市售）、油佐劑疫苗、鋁膠佐劑疫苗、蜂膠佐劑疫苗、細(xì)菌CpG DNA佐劑疫苗、轉(zhuǎn)移因

5、子疫苗、復(fù)合佐劑疫苗1、復(fù)合佐劑疫苗2在14d的抗體滴度分別為：29．5/27．9、28．0、29．0、27．8、29．0、28．8、29．0、28．9，在45d時(shí)抗體滴度分別為28．5/27．5、29．0、28．5、26．8、28．8、27．8、27．9、27．9，在85d時(shí)抗體滴度分別為：26．5/25．5、27．5、27．2、26．2、27．1、27．2、27．8、27．5，145d后抗體滴度普遍下降。所以在免疫產(chǎn)生時(shí)間、免疫力持

6、續(xù)期上，以油佐劑疫苗、蜂膠佐劑、細(xì)菌CpG DNA佐劑、復(fù)合佐劑疫苗1、復(fù)合佐劑疫苗2的效果較好，尤以復(fù)合佐劑疫苗1、復(fù)合佐劑疫苗2最好。在免疫攻毒試驗(yàn)中，7d、15d、50d、90d攻毒時(shí)，8種疫苗的成活率為均100％，150d攻毒時(shí)，組織滅活苗（自制/市售）、油佐劑疫苗、鋁膠佐劑疫苗、蜂膠佐劑疫苗、細(xì)菌CpG DNA佐劑疫苗、轉(zhuǎn)移因子疫苗、復(fù)合佐劑疫苗1、復(fù)合佐劑疫苗2的成活率分別為50％/25％、75％、50％、75％、75％、7