人血漿中r-和S-華法林定量分析方法及應(yīng)用.pdf

1、目的：建立LC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定人血漿中R-華法林和S-華法林，應(yīng)用于評(píng)價(jià)嗎啉硝唑?qū)θA法林代謝的影響。
　　 方法：以甲氯噻嗪為內(nèi)標(biāo)，經(jīng)乙醚：二氯甲烷(3∶2，v/v)提取后經(jīng)手性色譜柱Astec Chirobiotic TMV(150mm×4.6mmI.D.,5μm)分離。流動(dòng)相為5mmol.L-1醋酸銨水溶液(pH4.0)-乙腈(72∶28，v/v)，流速為1.5mL.min-1（柱后分流，離子源：廢液體積比-1∶2）。

2、采用API4000型三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀，電噴霧電離源，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)方式（MRM）進(jìn)行負(fù)離子檢測(cè)。定量分析的離子對(duì)分別為m/z307→m/z161（華法林）和m/z358→m/z322（內(nèi)標(biāo)甲氯噻嗪）。采用隨機(jī)雙周期交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，給予12名健康受試者華法林或同時(shí)給予嗎啉硝唑和華法林，按時(shí)間點(diǎn)采集血樣，以上述方法測(cè)定血漿中R-華法林和S-華法林濃度。
　　 結(jié)果：R-華法林和S-華法林的保留時(shí)間均小于5min，且分離度為1.56。R

3、-華法林和S-華法林的線性范圍均為5-1000ng·mL-1，日內(nèi)和日間精密度(RSD)均小于10％，準(zhǔn)確度(RE)在－4.9％～0.7％之間。同時(shí)給予嗎啉硝唑和華法林以及單獨(dú)給予華法林后，R-華法林和S-華法林的AUC0→168幾何均數(shù)比值的90％置信區(qū)間均在800％～125％之內(nèi)，Cmax幾何均數(shù)比值的90％置信區(qū)間均在80％～125％之內(nèi)。
　　 結(jié)論：本文建立的對(duì)映體選擇性測(cè)定人血漿中的R-和S-華法林的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)