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1、該研究用Northern blot比較了Smad7基因在永生化人支氣管上皮細(xì)胞BEP2D和α粒子輻射誘發(fā)惡性轉(zhuǎn)化的細(xì)胞BERP35T2中的表達(dá)差異以及細(xì)胞對(duì)TGF-β1細(xì)胞因子刺激的反應(yīng)性;同時(shí)收集46例臨床非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)標(biāo)本,用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腫瘤組織中SMAD7的表達(dá)豐度.克隆Smad7基因編碼區(qū)全長(zhǎng)cDNA,構(gòu)建真核表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染BEP2D及BERP35T2細(xì)胞,篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的陽(yáng)性細(xì)胞克隆,以外源性TGF-β1作為
2、刺激因子,觀察Smad7對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖的影響. Smad7基因同融合有堿性磷酸酶報(bào)告基因的順式增強(qiáng)子元件及Smad結(jié)合元件(SBE)共轉(zhuǎn)染BEP2D及BERP35T2細(xì)胞,以外源性TGF-β1作為刺激因子,檢測(cè)Smad7基因?qū)GF-β/SMAD信號(hào)通路及同生長(zhǎng)、增殖相關(guān)通路的影響;用RT-PCR法檢測(cè)Smad7高表達(dá)的細(xì)胞中TGF-β調(diào)節(jié)的兩類抗增殖基因表達(dá)水平的變化,以進(jìn)一步探討在α粒子輻射誘發(fā)細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化過(guò)程中, Smad7
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