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文檔簡介
1、 本文首先探討Smad7基因的小分子干擾RNA(siRNAs)是否能抑制基因的表達。本文利用RNA干擾技術(shù),設計并合成了針對Smad7基因的siRNAs,用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法瞬時轉(zhuǎn)染BEP2D和BERP35T2細胞,用Northern blot法檢測RNAi效應;同時設計并合成了綠色熒光蛋白(GFP)的siRNAs,瞬時轉(zhuǎn)染穩(wěn)定表達綠色熒光蛋白的BERP35T2細胞,檢測熒光強度有無改變。結(jié)果:RNA干擾技術(shù)能高效抑制Smad7基因的表達
2、,為進一步研究Smad7基因功能及TGF-β信號轉(zhuǎn)導通路奠定了基礎。然后本文探討了Smad7基因沉默對細胞惡性轉(zhuǎn)化過程的影響。方法:對Smad7基因沉默的BEP2D和BERP35T2細胞系,用MTT法檢測Smad7基因沉默后對細胞增殖能力的影響和對TGF-β介導的生長抑制效應的影響,并用流式細胞技術(shù)檢測Smad7基因沉默后對細胞凋亡的影響。研究表明:Smad7基因沉默后,其對TGF-β信號通路的抑制作用消失,TGF-β介導的生長抑制作用
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