c-Met抑制劑PHA665752能夠在體內(nèi)促結(jié)直腸癌對(duì)放射線的敏感性.pdf

1、結(jié)直腸癌是最常見的惡性腫瘤，據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)2014年發(fā)布的《世界癌癥報(bào)告》，2012年全世界患病率排前三癌癥的依次為肺癌(180萬)、乳癌(170萬)和大腸癌(140萬)，其中結(jié)直腸癌致死率排第四位。而在我國新增癌癥病例306萬例，死亡220萬例，其中直腸癌的發(fā)病率位居第四。
　　目前，對(duì)于局部進(jìn)展期的直腸癌患者（cT3/T4和/或cN+），術(shù)前新輔助同步放化療(chemoradiotherapy，CRT)已成為公認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)

2、的治療規(guī)范，且有的學(xué)者主張結(jié)腸癌T4期的患者給予術(shù)前放療。新輔助放化療旨在通過治療使腫瘤縮小、病理降級(jí)以及臨床降期，來增加手術(shù)根治性切除率。然而局部進(jìn)展期的直腸癌患者對(duì)于新輔助放化療的反應(yīng)程度并不樂觀，從完全的病理緩解到完全抵抗，患者的個(gè)體反應(yīng)差異很大。這樣，許多患者接受了不必要的甚至是有害的治療，同時(shí)也延誤了手術(shù)的時(shí)機(jī)，形成過度治療，使患者承擔(dān)了額外的痛苦及負(fù)擔(dān)。因此，很有必要探討直腸癌對(duì)放化療抵抗的機(jī)制，尋找可以增加腫瘤對(duì)放化療的敏

3、感性的靶點(diǎn)，為腫瘤患者的綜合治療提供依據(jù)，從而實(shí)現(xiàn)真正意義上的個(gè)體化治療。
　　c-Met是酪氨酸激酶受體家族（receptor tyrosine kinases，RTKs）的成員之一，在結(jié)直腸癌細(xì)胞中過量表達(dá)，且與腫瘤增殖、遷移、侵襲、腫瘤血管形成及肝轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。另外，其特異性配體為肝細(xì)胞生長因子/離散因子(HGF/SF)，在外周血血清中和腫瘤組織中的HGF表達(dá)水平明顯升高，提示我們c-Met可以成為結(jié)直腸癌治療的重要靶點(diǎn)。目

4、前，c-Met抑制劑和HGF拮抗劑已經(jīng)應(yīng)用于結(jié)直腸癌的研究，但是缺乏對(duì)于靶向抑制c-Met聯(lián)合放療及化療的研究。
　　在前期體外實(shí)驗(yàn)中，我們采用慢病毒介導(dǎo)的可調(diào)控誘導(dǎo)小干擾RNA(small interfering RNA，siRNA)技術(shù)，發(fā)現(xiàn)適當(dāng)沉默c-Met的表達(dá)可以增加結(jié)直腸癌細(xì)胞SW620對(duì)放化療的敏感性。本課題則研究:在體內(nèi)，靶向抑制c-Met對(duì)結(jié)直腸癌放射治療效果的影響。
　　目的:建立人結(jié)直腸癌SW620細(xì)胞

5、系裸鼠體內(nèi)種植模型，待成瘤后給予c-Met小分子抑制劑(PHA665752)以及聯(lián)合放射治療，探討靶向抑制c-Met與直腸癌新輔助放療敏感性的關(guān)系。
　　方法:
　　1建立人結(jié)直腸癌細(xì)胞SW620的動(dòng)物種植瘤模型。
　　2待成瘤后隨機(jī)進(jìn)行分組，給予不同處理:對(duì)照組(DMSO組)，c-Met抑制劑組，放療組，抑制劑+放療組。
　　3將殘存的瘤組織行石蠟包埋切片，應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)瘤組織中E-cadherin

6、、Vimentin、HIF-1α、γ-H2AX的蛋白表達(dá)情況;應(yīng)用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)檢測(cè)瘤體組織細(xì)胞凋亡情況。
　　結(jié)果:
　　1各實(shí)驗(yàn)組瘤體積與對(duì)照組相比，瘤體積顯著減小，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);放療+PHA組與放療組相比，瘤體積顯著減小，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　2免疫組化染色結(jié)果顯示，放療+PHA組與放療組相比較，E-cadherin表達(dá)量顯著升高(P＜0.01)，V