2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起的一種急性傳染病,是目前嚴(yán)重危害世界養(yǎng)豬業(yè)的一種重要病毒病,給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。為了有效的控制該病的發(fā)生,眾多科學(xué)家從事疫苗的開發(fā)和研究。然而,由于動物豬體在感染

2、PRRSV后所產(chǎn)生的免疫反應(yīng)和疾病的發(fā)展過程受多種因素的影響,致使疫苗的免疫效果不盡人意:其中,病毒感染的抗體依賴性增強(qiáng)作用(antibody-dependent enhancement,ADE)是關(guān)鍵影響因素之一。ADE即指機(jī)體的抗體水平在未達(dá)到中和抗體濃度時,可協(xié)助病毒進(jìn)入靶細(xì)胞,提高感染效率。
  目前.ADE作用已在多個科屬的40多種病毒的感染中發(fā)現(xiàn),如登革熱病毒、人免疫缺陷病毒、西尼羅河病毒等。與PRRSV相似的是這些病

3、毒多表現(xiàn)為嗜好在免疫細(xì)胞中繁殖,容易引發(fā)宿主的持續(xù)性感染。常規(guī)疫苗免疫防制這類具有ADE作用的病毒病時常常難以奏效,動物免疫后,對該病毒的易感性反而會增加。因此,有必要利用病毒模型,探討ADE在這類病毒中的致病機(jī)制。
  因此,為了更有效的防控PRRS的發(fā)生,本課題即從ADE角度出發(fā),闡釋了PRRSV的致病機(jī)理。本研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)亞中和活性的PRRSV特異性抗體存在時,PRRSV體外感染豬肺泡巨噬細(xì)胞(porcine alveolar

4、macrophages,PAMs)能力增強(qiáng),即,亞中和活性的抗體可促進(jìn)病毒的感染和釋放。已有的報(bào)道表明,介導(dǎo)ADE效應(yīng)的細(xì)胞表面分子有三種Fcγ受體(FcγRs),即:FcγRⅠ(CD64)、FeγRⅡ(CD32)和FcγRⅢ(CD16)。通過運(yùn)用熒光定量PCR方法,本研究發(fā)現(xiàn)CD16在PAMs的轉(zhuǎn)錄水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于CD32和CD64;同時,流式細(xì)胞術(shù)和Western blotting的結(jié)果也表明CD16在PAMs上高效表達(dá)。因此,本研究對

5、豬源CD16在PRRSV的ADE效應(yīng)中發(fā)揮的作用進(jìn)行研究。
  首先,運(yùn)用抗CD16的單克隆抗體特異性阻斷PAMs表面的CD16,探究CD16在PRRSV的ADE效應(yīng)中是否發(fā)揮作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn),CD16功能被抗體特異性阻斷后,PRRSV亞中和活性的抗體引發(fā)的PRRSV的ADE效應(yīng)顯著降低,說明PAMs表面的CD16能夠介導(dǎo)PRRSV的ADE。由于PAMs表面存在三種不同的FcγRs,為了特異性研究CD16,本研究在無FcγRs表達(dá)的

6、HEK293-T細(xì)胞和COS-7細(xì)胞上特異性表達(dá)豬源CD16,進(jìn)一步驗(yàn)證CD16介導(dǎo)的ADE效應(yīng)。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),PRRSV-抗體免疫復(fù)合物可特異性吸附在HEK293-T/CD16細(xì)胞和COS-7/CD16細(xì)胞,進(jìn)而使得PRRSV內(nèi)化進(jìn)入細(xì)胞。最后,本研究還發(fā)現(xiàn)內(nèi)化的PRRSV可以在這些細(xì)胞內(nèi)發(fā)生復(fù)制,并釋放出具有活性的子代病毒。此外,本研究還證明豬源CD16的高效表達(dá)需要和Fc受體γ鏈的協(xié)同表達(dá)。
  本研究對PRRSV的ADE效

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