豬轉(zhuǎn)移因子的研制及其對豬免疫功能的增強作用.pdf

1、轉(zhuǎn)移因子（transfer factor, TF）由白細胞中具有免疫活性的T淋巴細胞產(chǎn)生，分子量小，化學(xué)本質(zhì)為小肽與寡聚核苷酸復(fù)合物。本試驗通過采集健康的豬脾臟，透析法制備非特異性TF，經(jīng)檢測TF，結(jié)果蛋白反應(yīng)陰性、多肽含量等于0.615mg/ml、OD260/OD280為2.35，核糖含量測定45.2(ug/ml)。結(jié)果與資料報道TF質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)相一致。通過生物學(xué)試驗檢測TF，結(jié)果顯示:TF無毒、無熱源性、無過敏性，巨噬細胞吞噬中性紅

2、現(xiàn)象明顯，E-玫瑰花環(huán)結(jié)花率升高，說明TF具有免疫功能活性。本研究采用ELISA、流式細胞技術(shù)、全自動血細胞分析儀檢測了試驗豬TF配合疫苗注射，不同時間檢測豬口蹄疫、圓環(huán)病毒抗體的變化，淋巴細胞數(shù)和比率的變化，T細胞亞群的變化，在免疫應(yīng)答調(diào)控中起重要作用的細胞因子(IL-2和IFN-γ)分泌量的變化。在此基礎(chǔ)上，提出降低豬圓環(huán)病毒疫苗使用劑量可行性，緊急預(yù)防豬口蹄疫配合TF的必要性。
　　 本研究共分為以下四個部分:
　　

3、 第一部分轉(zhuǎn)移因子制作
　　 轉(zhuǎn)移因子(TF)制作工藝是:用豬脾置入搗碎機搗碎勻漿后冷凍、融化、凍融6-8后透析，透析液經(jīng)理化性質(zhì)和生物學(xué)特性符合要求即為合格制品。
　　 第二部分轉(zhuǎn)移因子的免疫增強效果
　　 符合要求的轉(zhuǎn)移因子作為一種安全、經(jīng)濟、使用方便、高效的疫苗佐劑顯示巨大的免疫增強效果，具體表現(xiàn)為:用原液的TF，防疫口蹄疫疫苗同時肌注轉(zhuǎn)移因子3ml，第二天再注射3ml轉(zhuǎn)移因子，能提高豬口蹄疫抗體含量，即

4、從注射后7d的70 ng/L左右至35日齡上升到300 ng/L以上;可以提高血液淋巴細胞比率、淋巴細胞數(shù);可提高淋巴細胞分泌IFN-γ，可促進淋巴細胞分泌IL-2;分泌IFN-γ時間較短，本試驗結(jié)果為注射后7日最高;淋巴細胞分泌IL-2時間較長，28日達到最高。
　　 第三部分轉(zhuǎn)移因子可作為疫苗佐劑，減少疫苗使用量
　　 用轉(zhuǎn)移因子原液，12日齡仔豬防疫豬圓環(huán)病毒疫苗1.2ml同時肌注轉(zhuǎn)移因子3ml，第二天再注射3ml

5、轉(zhuǎn)移因子，7-35日齡時間段，能達到防疫2ml圓環(huán)病毒疫苗同樣效果，即轉(zhuǎn)移因子作為疫苗佐劑使用顯示的巨大的免疫增強效果;同樣用轉(zhuǎn)移因子原液制品，12日齡仔豬防疫豬圓環(huán)病毒疫苗0.9ml同肌注轉(zhuǎn)移因子3ml，第二天再注射3ml轉(zhuǎn)移因子，與單防疫2ml圓環(huán)病毒疫苗相比，前者一些指標(biāo)效果不及后者，且差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 第四部分轉(zhuǎn)移因子可提高豬外周血CD4+細胞數(shù)量及CD4+/CD8+比值
　　 防疫