視紫紅質基因、桿體α-cGMP門離子通道基因和類矮胖基因1與視網膜色素變性分子遺傳學關系的研究.pdf

1、天津醫(yī)科大學博士學位論文視紫紅質基因、桿體αcGMP門離子通道基因和類矮胖基因1與視網膜色素變性分子遺傳學關系的研究姓名：熊世紅申請學位級別：博士專業(yè)：眼科學指導教師：趙堪興2001.2.1’——一丕望墮型查堂苧圭蘭垡堡苧視紫紅質基因、a—cGMP門離子通道基因和類矮胖基因1與視網膜色素變性分子遺傳學關系的研究摘要研究目的；檢測RP病人的視紫紅質基因、QcGMP門離子通道基因和類矮胖基因1突變，分析突變類型和突變頻率以及與臨床表型的關系

2、?！蚓糠椒ǎ?、分子遺傳學研究：我們應用PCRSSCP的方法檢測了14個ADRP家系和35個ARRP家系先證者和55個散發(fā)病例視紫紅質基因的全部編碼區(qū)，檢測了35個ARRP家系先證者和55個散發(fā)病例CNCGl的全部編碼區(qū)，檢測了35個ARRP家系先證者和55個散發(fā)病例TULPl第13、14外顯子的基因突變。(1)基因組DNA提?。翰赏庵莒o脈血58ml，應用RocheBiochimical公司的DNA分離試劑盒提取基因組DNA。(2)聚

3、合酶鏈反應：采用美國PerkinElmer公司2400型PCR儀，PCR反應體系為20p1。(3)DNA單鏈構象多態(tài)性分析：利用非變性聚丙烯酰胺凝膠(10％)電泳，分析DNA單鏈構象，發(fā)現變異帶。(4)DNA測序：通過非變性聚丙烯酰胺凝膠(10％)電泳，如果發(fā)現變異帶，則將其相應的外顯子PCR產物(大約100山)進行純化，用ABI377測序儀進行直接DNA測序。2、臨床研究方法：臨床研究包括詢問病史，檢查視力、裂隙燈、眼底、視野(包括周