新型真菌源激活蛋白的分離純化及生物功能的研究.pdf

1、激活蛋白(Activator Protein)是一類源于真菌的新型蛋白激發(fā)子，前期研究發(fā)現(xiàn)該蛋白激發(fā)子具有誘導(dǎo)植物抗性和促進(jìn)植物生長(zhǎng)的作用。激活蛋白是一類新型的生物農(nóng)藥，具有廣譜高效、多功能和無(wú)殘留的特點(diǎn)。本文研究了病原真菌的培養(yǎng)與激活蛋白的純化、對(duì)植物生長(zhǎng)及其生理活性的影響。測(cè)定了不同濃度激活蛋白處理對(duì)作物生理特性的影響及其經(jīng)激活蛋白處理后，植物的纖維素酶活性，過氧化氫和脯氨酸的含量，從而研究其作用機(jī)理，為進(jìn)一步的商業(yè)化生產(chǎn)起到一定的

2、作用。 1、病原真菌的培養(yǎng)與激活蛋白的純化本實(shí)驗(yàn)室保存的稻瘟菌在液體PDA培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)后，抽提蛋白，利用硫酸銨沉淀法將粗蛋白沉淀，后利用酒精沉淀蛋白一次，利用FPLC高效蛋白純化系統(tǒng)進(jìn)行蛋白純化，通過離子交換層析、疏水層析和分子篩連用的方法獲得了純化的該蛋白。實(shí)驗(yàn)證明，用pH7.5的MES緩沖液條件下獲得的初步純化的該蛋白。將上述蛋白樣品過分子篩后獲得的單峰為純化蛋白。利用固相梯度凝膠電泳獲得該蛋白的等電點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)證明該蛋白的

3、等電點(diǎn)為4.314±0.035，是一種酸性蛋白。 2、為探討真菌源激活蛋白在促進(jìn)作物生長(zhǎng)方面的效果，研究了不同濃度激活蛋白處理對(duì)多種作物的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，用2～3 μg/mL的新型激活蛋白浸泡棉種6h，能顯著提高種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率。番茄和絲瓜種子分別用1μg/ml的蛋白浸種6h，能顯著提高種子的發(fā)芽率。黃瓜種子用500倍和1000倍液都能顯著提高種子的發(fā)芽率。為探討真菌源激活蛋白對(duì)大田作物的效果，研究了不同濃度激活蛋白處理

4、對(duì)油桃、大蒜、冬棗的影響。結(jié)果表明，用1000-1500倍液在大田中就可有良好的效果。 3、為探討真菌源激活蛋白在促進(jìn)植物生長(zhǎng)和增產(chǎn)方面的作用機(jī)理，研究了不同濃度激活蛋白處理對(duì)大豆幼苗生理特性的影響。結(jié)果表明，經(jīng)1、2、5 μg/mL激活蛋白處理后第7d，大豆幼苗根系活力比對(duì)照分別增加了44.2％、54.5％和19.8％，硝酸還原酶活性比對(duì)照分別增加了61.33％、138.37％和53.2％。 4、研究表明，稻瘟菌激活蛋