棉稈蛋白的提取及分離純化.pdf_第1頁(yè)
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1、本文采用不同的提取方法提取棉稈蛋白,對(duì)影響棉稈蛋白提取率的因素進(jìn)行了研究,并對(duì)棉稈蛋白進(jìn)行了分離純化,采用凝膠過(guò)濾柱層析和SDS-PAGE對(duì)棉稈蛋白分子量的組成情況進(jìn)行了初步了分析。 棉稈粗蛋白的提取實(shí)驗(yàn)主要考慮的影響因素有:pH值、提取劑種類(lèi)、提取劑濃度、提取溫度、提取時(shí)間、提取劑體積等。實(shí)驗(yàn)中采用的提取方法有NaOH提取法、NaCl提取法、H2O提取法、超聲波法、纖維素酶法、表面活性劑法、AUC提取法、乙酸提取法。其中對(duì)Na

2、OH提取法、NaCl提取法、H2O提取法進(jìn)行了正交試驗(yàn),研究各方法對(duì)棉稈蛋白提取率的影響。結(jié)果表明,以NaOH為提取劑時(shí),NaOH濃度為0.3﹪,提取溫度50℃,提取時(shí)間120min,提取劑體積100ml,提取2次,棉稈蛋白提取率可達(dá)72.60﹪;以NaCl為提取劑時(shí),NaCl濃度為0.8﹪,提取溫度50℃,提取劑體積80ml,提取時(shí)間60min,提取2次,棉稈蛋白提取率達(dá)到52.03﹪;以H2O為提取劑時(shí),提取溫度60℃,提取時(shí)間90

3、min,提取劑體積90ml,提取2次,棉稈蛋白提取率達(dá)到49.50﹪。本實(shí)驗(yàn)采用堿性H2O2法對(duì)NaOH提取的棉稈蛋白進(jìn)行了脫色,研究結(jié)果表明,H2O2添加量12﹪,pH值9,脫色時(shí)間45min,脫色溫度45℃,蛋白得率為94.41﹪,脫色后蛋白呈乳黃色。棉稈蛋白的凝膠過(guò)濾柱層析結(jié)果表明,上述三種方法提取的棉稈蛋白中不同分子量的蛋白所占比例不同。SDS-PAGE分析結(jié)果表明,棉稈蛋白亞基分子量主要分布在20,000Da以下,40,000

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